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08分生思考
丁 一
1. 乳糖操纵子
含有三个结构基因,β-半乳糖苷酶:催化乳糖分解为葡萄糖和半乳糖; β-半乳糖苷透过酶:促进乳糖转运入细菌;硫代半乳糖苷转乙酰基酶,三个基因的上游 只有一个共同的启动子Piac。此外,在启动子的下游和上游还分别有操纵序列Oiac和CAP结合位点,这三者共同构成了乳糖操纵子的调控区,这一区域是控制结构基因是否 转录的开关在乳糖操纵子的上游还有一个调节基因I,其编码产物是lac阻遏蛋白,在没有诱导剂的情况下,阻遏蛋白可与操纵序列特异结合并阻止结构基因的转录。
乳糖操纵子的转录起始是由CAP和阻遏蛋白两种调控因子来控制。CAP起正调控作用。
2. 真核基因组的特点
⑴. DNA量大。
⑵. 真核细胞的编码基因大多是不连续的,由外显子和内含子镶嵌排列而成。
外显子(exon):为蛋白质氨基酸编码的DNA序列。
内含子(intron):插入到编码序列之间的非编码序列。
内含子功能: ①含调控序列,参与基因表达。
②不同的剪接,产生不同的产物。
③提供变异机会,与进化有关。
⑶. 真核生物DNA中含有大量重复序列。重复序列:在基因组中多次反复出现的DNA序列,按其出现的频率可分为低度、中度(103-104)和高度(106)重复序列,出现原因:①基因的多拷贝。②与染色质的构像、着丝点形成有关。③参与表达调控,染色质DNA的“区间性”。
⑷. 不存在操纵子结构。
3. 真核基因转录前表达调控的方式
是发生在基因组水平上的基因结构的改变。包括:
①基因丢失:体细胞分化过程中,必须将某些基因永久性关闭。最简单有效的方式--将这些基因丢失。
②基因扩增:发育分化、环境条件的改变,对某些基因产物的需要量急剧增加-增加该基因的拷贝数。不适当的基因扩增,可导致肿瘤的发生
③基因重排:某些基因片段改变原来存在的顺序重新排列组合。
④甲基化修饰:DNA甲基化可引起构象、稳定性和染色质结构的改变,并影响DNA与蛋白质的相互作用,抑制基因的转录。抑制取决于甲基化CpG的密度和启动子的强度,转录活跃的基因是低甲基化或不甲基化,而不表达基因的则高度甲基化。
⑤染色质结构:DNA+HP+NHP+RNA
4. 顺式调控元件(cis-acting element, CAE)
与结构基因串联的特定的DNA序列。包括启动子、、、3)沉寂子(silencer) :抑制基因转录。CD4/CD8基因在胸腺中受到沉寂子对其细胞亚型和成熟过程特异性的选择表达。
(4)加尾信号:在poly A尾位点上游10-20bp 处,常见1保守的AATAA序列,如去除此序列,基因会连续转录下去而不终止。
5. RNA“编辑” (RNA editing):
是RNA分子上的一种修饰,通过核苷酸插入、缺失、替换,使信息改变,产生氨基酸序列不同的多种蛋白质,以扩大遗传信息,提高生物适应。
6. 反式作用因子的结构
由位于不同染色体或同一染色体上相距较远的基因编码的蛋白质因子。
反式作用因子的结构:一个完整的反式作用因子含有2个必不可少的结构域,即DNA结合结构域(DNA binding domain)和转录活化结构域(trans-activating domain)。反式作用因子通过前者与DNA特定序列结合,通过后者发挥转录活化功能。组织特异性转录因子常常只具有2个结构域之一,因此其仅仅在那些提供了其缺失部分蛋白质的细胞中互补为具有2个结构域的DBP,才能发挥作用。
(1)DNA结合结构域
①锌指结构域(zinc finger motif):最常见、最普通。结合特异性可能由位于指状结构基部的非保守氨基酸决定。
②同源盒结构域(homodomain, HD):同源盒(homebox):同源盒基因家族各基因间均有1相同的保守序列(约183bp),称同源盒。同源盒结构域(homodomain, HD):同源盒产物蛋白中所具有的1非常相似的结构域。
③亮氨酸拉链(leucine zipper):通过该结构域可形成同源或异源二聚体,二个分子α螺旋的亮氨酸一侧是形成二聚体的基础,形同拉链。
④ 碱性螺旋袢-螺旋:底部的DNA-结合螺旋(单体的N-末端)被非螺旋的袢所分隔。
(2)转录活化结构域:
①酸性α-螺旋结构域(acidic α-helix domain):含有较多负电荷,并能形成亲脂性α-螺旋。
②富含谷氨酰胺结构域。
③富含脯氨酸结构域。
反式作用因子的作用机制:
(1)转录因子相互作用:转录因子的协同结合通过HMG1促进,引起的增强子序列的弯曲是增强体形成的关键。
(2)竞争性排除组蛋白:序列特异性转录因子与转录起始复合物稳定结合,可竞争性地排除组蛋白,阻断其对转录的抑制作用。
(3)与核基质蛋白作用:某些转录因子的活化区域与核基质结合,将基因
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