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- 2017-05-07 发布于湖北
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pcr说明及注意事项要点
* PCR技术产生的背景: DNA双螺旋结构于1953年发现,自此确立了它就是细 胞里携带遗传信息的分子。 第一个细胞内用来复制DNA所需的聚合酶polymerase,即PCR之P),也早在1956年分离成功。 几十年来,在试管内复制DNA已是许多实验室的例行工作。 PCR技术浅淡 微生物教研室:曹康 PCR的发明人,一般公认是穆里斯(K. Mullis),他于1983年发明了PCR技术,这是分子生物学上的一次革命,他也因此获得了1993年的诺贝尔化学奖。 PCR技术的基本原理 1, 变性:一般93~95度 2, 退火:一般55度左右,根据具体 的情况决定 3,延伸:一般72度,PCR产物每kb一 分钟 pcr.swf.swf 常用的PCR技术 普通PCR RT-PCR Race PCR 巢式PCR Real-time PCR 通常,PCR在分子克隆和DNA分析中有着以下多种用途: (1) 生成双链DNA中的特异序列作为探针;(2) 由少量mRNA生成 cDNA文库;(3) 从cDNA中克隆某些基因;(4) 生成大量DNA以进行序列测定;(5) 突变的分析; 我们可以利用PCR做些什么工作 克隆基因,构建质粒 扩增核酸,用于检验 质粒点突变 连接(overlap P
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