匙精胶囊毒理学研究.docVIP

　　匙精胶囊毒理学研究 作者：肖小华 徐丽瑛 朱令元 丁琦 郭晟 方铝 钟小群 【摘要】 目的观察小鼠和大鼠分别灌胃给予匙精胶囊的急性毒性作用和长期毒性作用。方法采用Bliss法测定小鼠灌胃匙精胶囊的LD50以及大鼠连续灌胃匙精胶囊180 d，观察给药180 d的生长、发育，血液学、血液生化学、组织病理变化及停药30 d时上述指标的变化。结果昆明种小鼠灌胃匙精胶囊的LD50为294.23 g/kg。匙精胶囊大鼠给药180 d的毒性试验，剂量分别为5.0，10.0，20.0g/kg （指含生药量，下同）（相当于临床60 kg人用量的13.3，26.7，53.3倍），给药期间各组大鼠毛色、活动、二便均无异常变化，但给药组大鼠摄食、饮水、体重以及部分血液生化学指标和脏器系数有异常变化，停药后，上述异常变化指标均已恢复正常。给药期和恢复期主要脏器病理组织学检查，除给药期间高剂量死亡7只大鼠，解剖发现其肺部和肾脏均有感染，其它给药各组大鼠均无异常发现。结论长期大剂量灌胃给予匙精胶囊对大鼠有一定毒性，但停药后均已恢复。 【关键词】 匙精胶囊 急性毒性实验 长期毒性实验 匙精胶囊由匙羹藤叶和黄精组成，其功能为清热凉血，活血化瘀，益气养阴，降糖止渴，用于2型糖尿病，中医消渴病热盛血瘀、气阴两虚证的 治疗 。本次实验目的是观察小鼠灌胃给药的急性毒性反应以及大鼠连续给药180 d所产生的毒性反应和严重程度，以及停药后的 发展 和恢复情况，为临床安全用药提供依据。 　　1 器材与方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 动物 SD大鼠，体重100～120 g，雌雄各半；昆明种小鼠，体重18～22 g，雌雄各半，均为清洁级，由 中国 科学 院上海实验动物中心提供，合格证号：中科动管第003号。 　　1.1.2 药物 匙精胶囊由天然药物研究室提供，批号实验前用蒸馏水配成不同浓度的溶液供灌胃使用。 　　1.1.3 仪器 BT-224半自动生化分析仪，意大利产；BT-2100血细胞分析仪，意大利产。 　　1.2 方法 　　1.2.1 小鼠LD50测定 动物按体重随机分为5组，每组10只，雌雄各半，按0.3 ml/10g灌胃给匙精胶囊，一天内共灌胃4次，每次间隔5 h。剂量分别为184.93，228.31，281.86，347.98，429.60 g/kg，连续观察14 d，记录小鼠毒性反应和死亡情况，死亡动物进行尸检，记录病变情况，按Bliss法 计算 半数致死量（LD50）和95%可信限。 　　1.2.2 大鼠长期毒性实验 大鼠实验前先对其观察1周，包括外观体征、行为活动、腺体分泌、呼吸、粪便性状、食量、体重等，取大鼠160只，雌雄各半，按体重均匀随机分为4组，即对照组和匙精胶囊低、中、高3个剂量组（以下分别简称低、中、高剂量组），每组40只（雌雄各20只)。低、中、高3个剂量组分别给予匙精胶囊5.0，10.0和20.0 g/kg，对照组给予等容积水，灌胃给药1 ml/100 g，1次/d，连续6个月。在给药期间每天观察动物行为、毛色，二便等一般情况，每周称1次体重和大鼠摄食、饮水量，于给药3个月和6个月分别每组处理12只（雌雄各半）和16只（雌雄各半）大鼠，测其凝血时间，血常规，血小板计数，血清生化指标（ALT，AST，ALP，BUN，CRE，TP，GLU，ALB，TCHO，TBIL），然后拉断颈椎处死动物，进行尸检，取其心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、脑、睾丸（连附睾）、前列腺、卵巢、子宫、用 电子 天平称其湿重，并计算其脏器系数。同时取其心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、甲状腺、脑、睾丸（连附睾）、前列腺、卵巢、子宫、胰腺、胃、十二指肠作病理切片，记录其组织学改变情况，并摄下彩色图片，各项测得数据按性别分组进行统计学处理，用t值法进行组间比较。 　　所留下的动物停药观察1个月后，重复上述检查。 　　2 结果 　　2.1 小鼠的急性毒性实验 各组小鼠死亡前大便溏稀，踡卧少动，死亡后大体解剖除见胃、肠道膨胀充气外，其他脏器，如心、肝、脾、肺、肾、胸腺等均无异常变化。其余存活小鼠最后一次灌胃后14 d内，色泽、外观、摄食等均无异常情况。用Bliss法 计算 匙精胶囊灌胃给药小鼠的（LD50）和95%可信限，结果为LD50是294.23 g/kg，LD50 95%的平均可信限为267.98～323.05 g/kg。 　　2.2 大鼠的长期毒性实验 　　2.2.1 一般情况 本次实验中，各组大鼠给药期间行为、步态、毛色、粪便性状与水组相比，未见异常变化，停药观察1个月亦无改变。中剂量雌雄大鼠各死亡1只，由于灌药入肺导致，解剖发现肺呈水肿实质样。高剂量雌性大鼠死亡3只，高剂量雄性大鼠死亡4只。死亡大鼠病理解