巨大芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因的重组和表达研究_周丽萍.pdfVIP

17 2 第 卷第 期 中国现代医学杂志 Vol.17No.2 2007 1 年 月 ChinaJournalofModernMedicine Jan.2007 1005-8982200702-0172-03 文章编号： （ ） ·论著· 巨大芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因的 重组和表达研究* 1 2 周丽萍 ，徐 军 1 2120012 212002 （ 江苏大学医学技术学院，江苏 镇江 ；江苏大学附属人民医院，江苏 镇江 ） 摘要：目的 运用聚合酶链反应技术从巨大芽孢杆菌中获得葡萄糖脱氢酶基因，并表达该基因。方法 根 PCR , pET22b 据巨大芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因两端序列设计引物，通过 获得该基因 与表达载体 连接后转 化至大肠杆菌JM109DE3 SDS （ ）进行诱导表达。结果 重组基因表达产物经 电泳鉴定显示特异性条 u u 带,并且酶活力达15/mL，比活力为10/mg。结论 运用基因工程手段获得了葡萄糖脱氢酶基因，经诱导获 得了较高产量的葡萄糖脱氢酶。 关键词： 巨大芽孢杆菌；葡萄糖脱氢酶；基因；重组；表达 中图分类号： R37 文献标识码： A Recombinationandexpressionofglucose dehydrogenasefromBacillusmegaterium* 1 2 ZHOULi-ping,XU-jun (1.SchoolofMedicalTechnology,JiangsuUniversity,Zhenjiang，Jiangsu212001,P.R.China;2The AffiliatedPeople′sHospitalofJiangsuUniversity,Zhenjiang，Jiangsu212002,P.R.China) Abstract:【Objective】Toobtainageneencodingglucosedehydrogenase(GDH)fromBacillusmegateriumand expressit.【Methods】Designedprimersbasedonthegenesequenceandobtainedthegeneusingpolymerasecy- clingreaction(PCR),thepET22bvectorcombinedwiththeGDHgenewastransformedintoJM109(DE3)toexpress byinducing.【Results】SDSshowstwospecificsubunitslineandthefluidalsohas