时间分辨荧光免疫分析技术研究现状及进展.pdf

第16卷 第1期 生命科学 Vol. 16, No. 2004年2月 Chinese Bulletin of Life Sciences Feb., 2004 文章编号：1004-0374 (2004) 01-0055-05 时间分辨荧光免疫分析技术研究现状及进展 * 沈　健 ，林德球，徐　杰 （华南师范大学生命科学学院，广州 510631） 摘　要：时间分辨荧光免疫分析是一种新型的超微量的免疫标记分析方法，集酶标记免疫分析和放射免疫 分析等优点于一身，且无放射性污染等。本文主要介绍了时间分辨荧光免疫分析的原理、优点，螯合剂 的种类，以及各种分析技术及其应用现状和进展。 关键词：时间分辨荧光；免疫分析 中图分类号：Q331　　文献标识码：A Present situation and progress of time-resolved fluoroimmunoassay SHEN Jian*, LIN De-Qiu, XU Jie (College of Life Sciences, South China Normal University, Guangzhou 5 1063 1, China) Abstract: In this p aper, we present a new immunoassay technology—time-resolved fluoroimmunoassay, intro- duce its principle and advantage, the kind of its chealate,study its analytical technique,and introduce its situation and progress. Key words: time-resolved fluorescence; immunoassay 1　前　言 2　时间分辨荧光免疫分析的原理和优越性 放射免疫分析以其高度特异性、灵敏度和实用 时间分辨荧光免疫分析 性，吸引着各国的生物医学工作者，但该方法存在 oroimmunoassay, TRFIA)是20世纪80年代初 放射性污染、半衰期短及试剂盒稳定性差等问题。 Pettersson等和Eskola等创立的一种非放射性标记免 为此，科研者研究发展了一系列非放射性标记技 疫分析技术，与传统的荧光素标记不同，它是以镧 术，如酶标记、化学发光、生物发光标记等技术， 系元素，如铕(Eu)、铽(Tb)、钐(Sm)、铌(Nd)等 其中，时间分辨荧光免疫分析技术，因灵敏度及线 为标记物。因此，又称为 “解离－增强镧系荧光 性范围明显优于其他技术，最为引人注目。它克服 免疫分析” [4] 了酶标记物的不稳定性、化学发光仅能一次发光且 fluoroimmunoassay, DELFIA)。在传统的荧光标记 易受环境干扰和电化学发光的非直接标记等缺点， 免疫中，标记物采用的是异硫氰酸荧光素，其激发 降低了非特异性信号，达到了极高的信噪比，大大 光和发射光谱Stokes位移较小，只有28nm，由于 地超过了放射性同位素所能达到的灵敏度，且还具 常有部分重叠，测量荧光强度时不可避免地产生干 有标记物制备方便、储存时间长、无放射性污染、 扰。 检测重复性好、操作流程短、标准曲线范围宽、不 Eu和Tb类螯合物标记抗体抗原进行免疫分析 [4~5] 受样品自然荧光干扰、应用范围广泛等优点，是一 具有以下优越性 ：(1)激发光谱带较宽，激发最