大蓟提取液对4种癌细胞生长抑制作用的研究.docVIP

　　大蓟提取液对4种癌细胞生长抑制作用的研究 作者：李煜，王振飞，李瑶，戴宝贞，贾瑞贞，杨利军，黄翔华 【摘要】 　　目的研究大蓟提取液对癌细胞生长的抑制作用。方法细胞形态观察和活细胞计数法研究大蓟提取液对人白血病细胞K562，肝癌细胞HepG2，宫颈癌细胞Hela，胃癌细胞BGC823生长的抑制作用。结果大蓟提取液可使4种癌细胞形态上发生皱缩、变圆、脱壁、碎裂等变化，生长受到明显抑制，抑制率最高可达92.34%。结论大蓟有确切的抑癌作用，并与中医的气血理论、药物归经理论和肝肾同源理论相一致，在体外细胞水平上也有良好体现，对实验室手段研究中医药同样有着重要指导意义。 【关键词】 大蓟 癌细胞 生长 抑制作用 　　Abstract:ObjectiveTo investigate the inhibitory effects of the extract from Cirsium japonicum Fisch.DC the on groan carcinoma cells. MethodsMorphological change observation and live cell accounting japonicum Fisch.DC on human chronic myloid leukemia K562 cell, hepatoma HepG2 cell, cervical carcinoma Hela cell and gastric carcinoma BGC823 cell. ResultsGro Cirsium japonicum Fisch.DC，the highest inhibitory rate orphological changes included shrinkage, roundness, floating and crumbling. ConclusionCirsium japonicum Fisch.DC has reliable carcinoma-inhibiting effects and the effects conform to the qi and blood theory, the Meridian-reaching theory and the liver-kidney homology theory of traditional Chinese medicine, edicine portant guidance meaning to Chinese traditional medicine research by laboratory methods. 　　Key japonicum Fisch.DC; Carcinoma cell; Groin，纱布过滤，滤渣加适量六蒸水置110℃高压蒸气锅内20 min，纱布过滤；合并两次滤液，2℃冰箱中静置72 h，高、中、低速滤纸，0.45 μm，0.22 μm微孔滤膜逐级过滤；滤液蒸发浓缩、灭菌、4℃保存，使用时以培养液稀释至所需质量分数（以生药 计算 ）。 　　1.2 器材与试剂 　　倒置相差显微镜（Nikon eclipseTE2000-U），超净台（苏州净化设备有限公司），CO2培养箱（GALAXY BINDER），24孔培养板（BIOFIL），RPMI1640、高糖DMEM（GIBCO），胎牛血清（TBD）。 　　1.3 癌细胞系 　　人白血病细胞系K562，肝癌细胞系HepG2，胃癌细胞系BGC823，宫颈癌细胞系Hela（均由本实验室传代保种），均常规传代培养。 　　 2 方法 　　2.1 分组每种细胞均设对照组（不加药）与观察组（加药），观察组分设高（12 mg/ml）中（6 mg/ml）、低（2 mg/ml）3个剂量组。 　　2.2 加药处理取对数生长期的4种癌细胞，均以2×104/孔接种于24孔培养板，接种24 h后加药。加药后：①每天于倒置相差显微镜下观察细胞形态变化；②每隔24 h各组均取5孔细胞台朌蓝拒染法计活细胞数，每孔计3次，5孔取平均值，计算出当天的生长抑制率，抑制率（%）=［（对照组平均活细胞数-观察组平均活细胞数）/对照组平均活细胞数］×100%［1］，连续6 d。 　　2.3 抑制效果的判断与分析①细胞形态的观察与分析；②平均抑制率：6 d的抑制率相加取平均值；③最高抑制率：每种细胞各剂量组取其6 d中最高的1 d。抑制率的比较采用χ2检验。 　　 3 结果 　　3.1 大蓟提取液对4种癌细胞形态的影响对照组：K562（图1）大小均匀，胞体圆整，折光性好，日益密集；HepG2（图2）、Hela（图3）和BGC823（图4）紧贴板壁，胞间紧密接触，胞质透亮，可见分裂