2015届高考一轮生物详细复习〔生物技术在其他方面的应用〕课件新人教版.pptVIP

【例3】　细胞中含有大量的血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白。下列对血红蛋白提取和分离的叙述，错误的是(　　) A．血红蛋白提取和分离一般按照样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定的顺序进行 B．纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液 C．粗分离中透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质 D．可经SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定 解析：蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。提取和分离血红蛋白时，首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即样品处理；再通过透析法除去相对分子质量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量较大的杂蛋白除去，即样品纯化，纯化过程中凝胶应用蒸馏水充分溶胀后，配制成凝胶悬浮液，而不是用生理盐水；最后经SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。 答案：B 跟踪训练 (双选)在血红蛋白的提取和分离实验中，下列操作正确的是(　　) A．分离红细胞时需去除上层透明的黄色血浆 B．红细胞释放出血红蛋白时只需加入蒸馏水 C．分离血红蛋白溶液是低速短时间离心 D．洗脱时，待红色蛋白质接近色谱底端时，用试管收集流出液 解析：血红蛋白的释放：加蒸馏水到原血液的体积，再加40%体积的甲苯，充分搅拌10 min，红细胞破裂释放出血红蛋白；分离血红蛋白溶液是以2 000 r/min的速度离心10 min，从而将溶液分成四层。 答案：AD * * 生物技术在其他方面的应用 DNA的粗提取与鉴定 1．DNA与蛋白质在NaCl溶液中溶解度比较。 2 mol/L NaCl溶液 0.14 mol/L NaCl溶液 溶解规律 DNA 溶解 析出 蛋白质 部分发生 盐析沉淀 溶解 NaCl溶液从2 mol/L降低过程中，溶解度逐渐增大 2.DNA粗提取与鉴定中不同试剂的用途及原理比较。 二 苯胺 鉴定剂 DNA遇二苯胺(沸水浴)会变蓝色 △ 柠檬 酸钠 0.03 g/mL 抗凝剂 除去血液中的钙离子，防止血液凝固 3.DNA粗提取实验材料和方法的选择。 (1)不同生物的组织中DNA含量不同。 在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。 (2)材料不同所采用的提取方法不同。 ①植物组织：取材→研磨→过滤→沉淀。 ②鸡血：制备鸡血细胞液→提取核DNA→溶解细胞核内DNA→析出并滤取DNA→DNA再溶解→提取较纯净的DNA。 4．DNA的析出与鉴定。 (1)析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液等体积的冷却酒精溶液(体积分数为95%)静置2～3 min，溶液中会出现白色丝状物(此即粗提取的DNA)，且玻璃棒沿一个方向搅拌卷起丝状物。 (2)鉴定： ?特别提醒： 1.不能正确区分动植物细胞获取含DNA滤液的原理和方法。 (1)动植物细胞获取含DNA滤液的原理和方法。 原理 操作 动物细胞(鸡血细胞) 在低渗溶液中会吸水涨破 在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液 植物细胞(洋葱) 洗涤剂能够瓦解细胞膜 在切碎的洋葱中加入一定量的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液 (2)实验中2次加蒸馏水、3次加氯化钠溶液和6次搅拌的作用。 ①2次加蒸馏水：第一次是在第一步，加水是为了使血细胞吸水膨胀破裂，加水后必须充分搅拌，使血细胞充分破裂；第二次加蒸馏水是在第三步，是为了稀释氯化钠溶液。 ②3次加氯化钠溶液：第一次加氯化钠后，必须充分晃动烧杯，使二者混合均匀，加速染色质中DNA与蛋白质分离，使DNA充分游离并溶解在氯化钠溶液中。第二次加氯化钠溶液是为了DNA的再溶解，这时溶液中的蛋白质含量已很少。第三次加氯化钠溶液是为了再次溶解DNA。 ③6次搅拌：除最后一次搅拌外，前5次搅拌均要朝一个方向。并且，在析出DNA、DNA再溶解和提取中，各步搅拌都要轻缓，玻璃棒不要直插烧杯底部，防止DNA分子断裂。 2．高考命题角度。 (1)原料、试剂角度：考查提取DNA的原料、试剂和方法。 (2)操作流程：考查DNA提取的操作过程及注意事项。 【例1】　在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述中正确的是(　　) A．用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L，滤去析出物 B．调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质 C．将丝状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色 D．用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同 解析：用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L时，滤取析出物；将丝状物溶解在2 mol/L的NaCl中，加入二苯胺试剂，需沸水浴加热几分钟，才呈蓝色；用菜花替代鸡血为实验材料，需要对材料的细胞壁进行处理。调节