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生物︰〔现代生物科技专题〕〔新人教版选修3〕
生物 选修3现代生物科技专题 目 录 专题1 基因工程 专题2 细胞工程 专题3 胚胎工程 专题4 生物技术的安全性和伦理问题 专题5 生态工程 专题1 基因工程 基因工程的诞生和发展 1.基础理论 艾弗里证明: 沃森和克里克: 克里克: 尼伦贝格: 基因工程的诞生和发展 2.工具基础 酶: 载体: 基因工程的发展 基因工程的工具 分子手术刀: 分子缝合针: 分子运输车: 一、蛋白质工程崛起的缘由 二、蛋白质工程的基本原理 何谓蛋白质工程? 在现代生物技术中,蛋白质工程出现得最晚,是在20世纪80年代初期出现的。1983年 “蛋白质工程”这个名词出现后,随即被广泛接受和采用。蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。 三、蛋白质工程的进展和前景 3.胰岛素改造 天然胰岛素制剂在储存中易形成二聚体和六聚体,延缓胰岛素从注射部位进入血液,从而延缓了其降血糖作用,也增加了抗原性,这是胰岛素B23-B28氨基酸残基结构所致。利用蛋白质工程技术改变这些残基,则可降低其聚合作用,使胰岛素快速起作用。该速效胰岛素已通过临床实验。 4.治癌酶的改造 癌症的基因治疗分二个方面:药物作用于癌细胞,特异性地抑制或杀死癌细胞;药物保护正常细胞免受化学药物的侵害,可以提高化学治疗的剂量。疱疹病毒(HSV)胸腺嘧啶激酶(TK)可以催化胸腺嘧啶和其它结构类似物磷酸化而使这些碱基3’-OH缺乏,从而阻断DNA的合成,杀死癌细胞。HSV—TK催化能力可以通过基因突变来提高。从大量的随机突变中进行筛选出一种酶,在酶活性部位附近有6个氨基酸被替换,催化能力20倍以上。 蛋白质工程的发展很快,研究工作很多,以上仅介绍了几个例子。蛋白质工程除了用于改造天然蛋白质或设计制造新的蛋白质外,其本身还是研究蛋白质结构功能的一种强有力的工具,它在解决生物理论方面所起的作用,可以和任何重大的生物研究方法相提并论。 ①不能转录为信使RNA,不能 编码蛋白质。 :能转录相应的信使RNA,能 编码蛋白质 编码区 非编码区 原核细胞的 基因结构 ②有调控遗传信息表达的核 苷酸序列,在该序列中, 最重要的是位于编码区上 游的RNA聚合酶结合位点。 启动子 补:真核细胞的基因结构 编码区 非编码区 非编码区 与RNA聚合酶 结合位点 内含子 外显子 能够编码蛋白质的序列叫做外显子 不能够编码蛋白质的序列叫做内含子 启动子 终止子 编码区上游 编码区下游 内含子: 外显子: 真核细胞的 基因结构 编码区 非编码区 外显子:能编码蛋白质的序列 内含子:不能编码蛋白质的序列 :有调控作用的核苷酸序列, 包括位于编码区上游的RNA 聚合酶结合位点。 非编码序列: 包括非编码区和内含子 都由能够编码蛋白质的______和具有调控作用的______区组成的 相同点 编码区是间隔的、_____的 编码区是 _____的 不同点 真核细胞 原核细胞 原核细胞与真核细胞的基因结构比较 思考 编码相同数目氨基酸的蛋白质,原核细胞与真核细胞基因结构一样长吗? 连续 不连续 编码区 非编码 三、转化受体细胞 转化 —— 方法 将目的基因导入 植物细胞 将目的基因导入 动物细胞 将目的基因导入 微生物细胞 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 ——显微注射法 ——用钙离子处理细胞(感受态细胞) 目的基因进入_________内,并且在 受体细胞内维持_____和_____的过程 受体细胞 稳定 表达 1、将目的基因导入植物细胞 (1)农杆菌转化法 双子叶植物中常用方法 (2)基因枪法 (3)花粉管通道法 单子叶植物常用的转化方法,成本较高 我国独创的转化方法 如:我国的转基因抗虫棉 三、转化受体细胞 书P16 显微注射技术 注入的是含有目的基因的表达载体 是转基因动物中采用最多、最有效的一种将目的基因导入动物细胞的方法。 2、将目的基因导入动物细胞 三、转化受体细胞 用原核细胞作为受体细胞的原因? 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等 大肠杆菌应用最为广泛 大肠杆菌细胞最常用的转化方法: Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA溶于缓冲液中与感受态细胞混合→在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子→完成转化过程。 3、将目的基因导入微生物细胞 三、转化受体细胞 四、筛选出获得目的基因的受体细胞 是检查基因工程是否成功的一步 (一)首先要检测转基因生物染色体 上的DNA上是否插入了目的基因 检测方法是 采用DNA分子杂交技术
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