糖苷类化合物血浆蛋白结合的研究_刘斐.pdfVIP

20 13 年10 月第30 卷第10 期 天 津 中 医 药 Oct ． 2013,Vol．30 No． 10 Tianjin Journal of Traditional Chinese Medicine 621 DOI：10.11656/j.issn.1672-1519.2013.10.15 糖苷类化合物血浆蛋白结合的研究* 刘 斐 1，2 ，张士俊 1，徐为人 1，申秀萍 1，商 倩 1，汤立达 1 （1.天津药物研究院释 药技术与药代动力 学国家重点实验室 ，天津市新 药设计与发现重点实验室 ，天津 300193 ；2.天津中医药大学，天津 300193） 摘要：[ 目的] 考察dapagliflozin 及其衍生物与大鼠血浆蛋白的结合规律以及结合位点。 [方法]采用平衡透析法和 高效液相色谱法（HPLC）测定血浆蛋白结合率，选出代表性化合物与地西泮和华法林进行竞争性结合实验，利用对接 计算进行结合位点的初步研究。[结果]dapagliflozin 的蛋白结合率随着血浆比例的增加而增大，糖苷类化合物结构变 化对蛋白结合率也有一定影响，地西泮和华法林对糖苷类化合物的蛋白结合影响较小，对接结果表明糖苷类化合物 主要与白蛋白的第2 个亚结构结合。[结论]dapagliflozin 及其衍生物具有较高的血浆蛋白结合能力，可能结合在与华 法林和地西泮不同的白蛋白结合位点，结构的变化可以一定程度改变蛋白结合率。 关键词：糖苷类化合物；蛋白结合率；结合位点 中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1672-1519（2013）10-0621-05 药物与血浆蛋白的结合是影响药物的分布、代 技有限公司，纯度98%）。磷酸氢二钾（天津滨海新 谢和消除的重要因素，也是导致药物相互作用的重 区科茂化学试剂有限公司）。 要因素，是新药评价不可缺少的指标。中国糖尿病 1.3 动物 Wistar 大鼠，180~220 g，天津市山川红 [1] （DM）的患病率增长较快 ，dapagliflozin 是高活性、 实验动物科技有限公司提供，许可证号：SCXK （津 高选择性的钠-葡萄糖协同转运蛋白2 （SGLT2）抑 2009-0001）。 制剂，属一类新型降糖药物。有文献报道 da－ 2 方法 pagliflozin 与人的血浆蛋白结合率高达91%[2] ，笔者 2.1 空白透析液 精密称取磷酸氢二钾14.110 g， 参照dapagliflozin 合成了一系列的衍生物（TY702- 磷酸二氢钾2.592 g ，氯化钠1.991 g，加入950 mL 蒸 5D、TY702 -10D 、TY702 -5R1 、TY702 -5R2 、TY702 - 馏水中溶解，用0.1 mol/L 的HCl 溶液调节pH 至 C1），具有较好的降糖活性，本课题主要研究它们的 7.4 ，并定容至1 000 mL。 血浆蛋白结合率，并探索可能的结合位点。 2.2 标准曲线 各糖苷类化合物加甲醇制成浓度 1 材料 分别为10、20、50、100、200 μg/mL 的标准样品溶液， 1.1 仪器 Waters-515 高效液相色谱仪。TGL-16B 取空白血浆200 μL 或者空白透析液200 μL ，分别 高速离心机（上海安亭科学仪器厂公司）。XW-80A 制成模拟血浆侧和透过液侧的标准样品，待混合平 涡旋混合器（上海精科实验有限公司）；DH5000BII 衡后，模拟血浆侧取溶液100 μL ，加入甲醇300 μL ， 恒温箱（天津市泰斯特仪器有限公司）。半透膜（直径 涡旋混合30 秒，以 16 114×g 离心10 min，取上清 4.4 cm ，长5 m，上海绿鸟科技公司，批。 液，进行HPLC 分析，以面积作为纵坐