活细胞的分子探针——绿色荧光蛋白.pdf

维普资讯 · 279 必然的相关性；⑧根据截短多肽迁移的长度， 展．相信灵敏度更高、适用范国更广的技术将 可以确证突变发生在cDNA或基因上的相 不断涌现。 对位置，从而有利于进一步的测序分析；④由 参 考 文 献 于这种技术揭示的突变产生的截短的蛋白产 物是疾病发生的诱因。因而避免了区分其它 l RoestPMAet Hom MoIGenet．1993；2 相关的病理性突变的困难．这在其它的突变 1719 检测中是不易做到的 2 0ritaM elal Genom[cs．1989；5f874 3 WhiteMBe‘ ．Genom~es，1992{12 310 1996年，Becker等 又发展了非放射 4 ForrestSM etd．AmJHomGenet．1991I49 性蛋白截短检测方法(non．radioactivePTT， 175 nrPTT)，即以生物素代替放射性 s作为检 5 PowdlSM a1．NewEngl】Medt1993j329 测标记 其优点有t①安全性高，检测中不再 1982 使用放射性物质}②生物索标记的敏感度不 6 LilIB a1．CancerRes，1994I54{4590 亚于放射性标记}@nrP r的检测时间(7 7 HamihonetalNewEnglJMedt1995{332 h)几乎比放射性PTT(9～15h)缩短了一 839 半；④标记有生物素的蛋白可以长期保存， 8 Ntcolaldes a1．Nature，1994；371{75 而 S标记的蛋白由于半衰期的限制无法做 9 XiaLetaL CancerRes，l996I56{2289 到这一点}⑤可以利用生物素与亲和素的亲 10 PlummetS ．Hum MolGenet。1995·4 1989 和作用，过柱来分离需要的翻译蛋白产物。 11 HogervorstFB al NatGenet。1995I1Q PTT作为一种新的突变检测方法，丰富 208 了当前的突变检测体系。但突变检测的方法 12 johanssonO “d Am JHum Genet．1996 是多种多样的 每一种方法均有其显著的优 58≈441 缺点 因此，研究者往往需要根据自已的研究 13 BeckerKF at．TIG．1996；12{250 目韵选择最适合方案。随着分子生物学的发 (1996—12—1B 渡墙 ) 277~2 活细胞的分子探针——绿色荧光蛋白 张鸿卿V本绍白 Qf口哆 北京师范大学生物系细晦生物学研究室 (北京。100875) 摘要 来自水母的绿色荧光蛋白(GFP)，在不加外痨c物质的情况下．紫外光激发后，能在原按 和真核活细胞中发绿色荧光．荧光性质稳定。突变蛋白发光效率提高，激发和发射光谱明显改变。 GFP是一种十分有用的活细胞分子