滇桂艾纳香中氨基酸的提取工艺研究.docVIP

　　滇桂艾纳香中氨基酸的提取工艺研究 作者：李倩，黄丽，林翠梧，韦保耀，滕建文 【摘要】 目的优选滇桂艾纳香中氨基酸的提取纯化工艺。方法采用不同的溶剂提取法,考察不同吸附时间、不同的pH值、洗脱剂种类、洗脱剂浓度对717阴离子树脂性能的影响。结果超声波辅助水提取得到较高的氨基酸提取率为0.220%,吸附时间6h,在提取液pH=12时上柱,用氯化铵梯度洗脱,氨基酸的收率可达87.11%，氨基酸纯度达到92.12%。结论该工艺条件回收率高且稳定达到了理想的实验效果。 【关键词】 氨基酸; 提取纯化; 717阴离子交换树脂 　　Abstract：ObjectiveTo optimize a technical process for extraction and purification of amino acids from Blumea riparia (BL.)DC. MethodsDifferent solvents ino acids and the effects of different absorption time, pH，eluate and eluate concentration on 717 anion exchange resin ino acids ino acids e 6h， pH =12，NH4Cl gradient elution.ConclusionThis method is efficient，stable and reasonable. 　　Key ino acids; Extraction and purification; 717 Anion exchange resin 　　滇桂艾纳香Blumea riparia(BL.)DC，在《 中国 植物志》里亦有收载，称假东风草[1]，民间习用全草入药。《中华药海》中记载，滇桂艾纳香性味归经:淡、甘平，入肝、肾、膀胱三经;功效主治活血止血——本品甘淡入肝，养肝活血，收敛止血，具有活血不伤血、止血不留淤之功，可用于各种出血症;利水消肿——本品甘淡渗利，可利湿行水，主治小便不利浮肿症，用其性平、无寒热、偏热颇，故寒症、热症可用之，尤对产后浮肿症佳。起活血养血、利水消肿之效[2]。《新华本草纲要》中亦提到其有活血、止血、利水的功能，用于治经期提前，产后血崩，产后浮肿，不孕症[3]。 　　滇桂艾纳香提取物的强极性部分富含氨基酸成分。氨基酸类化合物是一类重要的天然产物，广泛存在于动植物中[4]。有构成生物有机体的蛋白质氨基酸，和非蛋白质氨基酸，都具有多种生理活性，在医药及食品产业方面都有广泛的应用[5]。随着研究的深入，其种类也日趋增多， 1981年日本小菅卓夫首次从三七中分得了三七素，一种特殊的氨基酸β-N-乙二酸酰基-L-α，β-二氨基丙酸(β-N-oxalo-L-α,β-diaminopropionic acid) 具有缩短出血和凝血时间，有止血活性[6]。在临床术后常用的止血氨基酸,有止血芳酸、止血环酸和6-氨基已酸等，它们的结构类似赖氨酸，可以和纤溶酶(原)上的赖氨酸位点结合。从而阻止纤溶酶(原)与纤溶蛋白(原) 的结合，防止纤溶酶原激活和纤溶酶的破坏作用，减少纤维蛋白降解产物(FDP)和 D-二聚体的产生，可间接保护血小板功能，起到止血作用[7]。 　　目前主要对滇桂艾纳香地上部分的化学成分进行研究，集中在挥发性化学成分，有机酸，黄酮类物质[8～14]。未见对其氨基酸成分的研究报道，由于滇桂艾纳香与三七都具有止血化淤功效，而滇桂艾纳香的药理作用机理尚未明确，本文对滇桂艾纳香进行不同溶剂提取，717阴离子交换树脂富集纯化氨基酸，旨在进一步揭示其药效物质基础，为其进一步研究提供一定的 科学 依据。 　　 1 材料与仪器 　　滇桂艾纳香全草干草(广西桂西制药厂提供)。超声清洗器(上海科导超声仪器有限公司SK3310LHC);紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司SP-756P)。717阴离子交换树脂(三星树脂科技有限公司);谷氨酸对照品(上海昊化化工有限公司)。 　　 2 方法 　　2.1 氨基酸含量的测定采用国标GB/T 8314-2002 茶 游离氨基酸含量测定方法，用谷氨酸标准品。 　　2.2 游离氨基酸的提取及提取率测定分别采用50%乙醇，70%乙醇，水，80℃回流提取，及超声辅助水提法。提取率按以下公式 计算 : A=C/B×100%，A为提取率 ( % )，B为原药料质量 ( g)，C为提取得氨基酸质量 ( g)。 　　2.3 树脂的预处理及总交换容量的测定717阴离子交换树脂用过量的蒸馏水浸泡后，经1 mol/L氢氧化钠和1 mol/L盐酸重复处理后，最后再用1 mol/L氢氧化钠浸泡，用蒸馏水洗至中性备用。