荣昌猪遗传资源的保护与开发利用(王金勇).ppt

筛选到大量的差异表达基因，揭示了品种间、部位间、性别间脂肪组织巨大表型差异背后的分子调控机制。 差异基因染色体富集叠瓦图 差异基因表达模式聚类图 荣昌猪不同部位脂肪组织的基因表达谱研究 选择荣昌猪胚胎期发育和生后发育阶段的10个时间点 采用高通量测序手段大规模发现猪microRNA 特色（优势）性状遗传基础研究 猪microRNA组研究 完成了首个从出生前到出生后整个发育阶段的microRNA组图谱。 pre-miRNA序列增至867条，编码的成熟体miRNA序列增至1004条，其中特异miRNA序列达到777条。 猪microRNA组研究 特色（优势）性状遗传基础研究 全白荣昌猪耳聋的遗传机制研究 听觉脑干诱发电位图 正常个体 耳聋个体 底 回 中 回 顶 回 耳蜗毛细胞扫描电镜图 通过脑干听觉诱发电位（ABR）检测、扫描电镜、耳蜗铺片及抗体染色等证实，全白荣昌猪耳蜗毛细胞的缺失和纤毛的融合是导致耳聋的直接原因。 * 荣昌猪遗传资源的保护与开发利用 重庆市畜牧科学院 王金勇 面积1079 人口:81万 ? 起源于本地 （古昌州） 公元1567年前 起源 起源湖广移民带入 公元1649年后 康熙二年至四十年 清康熙四十年（1701）前后，经过长期战乱，人口大减，清廷先后招湖广、江西等省人民实行退荒，不少人在荣昌落户。广东和湖南的移民来川时，将当地的白猪仔带入荣昌饲养，经过自然选育，逐步成为目前远近闻名的荣昌猪。 余德仁先生 项目来源：“十一五”国家科技支撑计划 项目名称：荣昌猪品种资源开发关键技术研究与 产业化示范 项目编号：2007BAD51B03 牵头单位：重庆市畜牧科学院 参加单位：14个一级单位 起止年限：2007.07-2010.12 荣昌猪资源群体 的大规模基因筛查 育种素材的收集 育种基础群的组建 优异性状基因资源挖掘 DNA分子标记辅助选择、基因诊断技术 荣昌猪专门化品系 配套系 畜禽遗传资源冷冻保存库 保种核心群(场) 农村繁殖群 畜禽遗传资源共享平台 世代选育 猪肉精深加工 猪肉精加工关键技术 高效冷冻保存 技术体系建立 营养参数、饲养工艺 生物安全控制技术 课题一 课题二 课题三 课题四、五 课题六 产业化 示范 ? 高效冷冻保存技术研究 ? 三级保护体系建立 ? 特色（优势）性状遗传基础研究 ? 专门化品系选育 ? 数字化 高效冷冻保存技术研究 猪精液冷冻技术研究 实验研究： 实验1、精液冷冻保存基础液配方的筛选 实验2、精液冷冻保存液配方的优化 实验3、精液冷冻解冻液配方的筛选 实验4、精液冷冻解冻速率的筛选 猪精液冷冻技术体系 采精 精液活率检查 精液稀释 冻前平衡 液氮滴冻 精液品质检查 采用最优猪冷冻精液稀释液配方 解冻 输精 采用V号解冻液配方 解冻速率为 27.5℃/s 冻精入库 高效冷冻保存技术研究 猪卵母细胞冷冻保存技术研究 实验研究： 实验1、不同冷冻保护剂对猪MII期卵母细胞冷冻保存效果的影响 实验2、不同冷冻保存方法对猪MII期卵母细胞冷冻保存效果的影响 实验3、冻后猪卵母细胞作激活后发育效果 猪卵母细胞冷冻保存技术体系 卵母细胞体外成熟培养 OPS玻璃化冷冻 激活 玻璃化解冻 CB处理 发育培育44h 144h检测囊胚率 EDFS40 入库保存 检测卵裂率 FDA检测存活 场强100V/mm，80μs、3次，每次间隔100ms 7.5μg/ml 、6h 高效冷冻保存技术研究 猪胚胎冷冻技术研究 实验研究： 实验1、猪胚胎的常规冷冻保存 实验2、玻璃化冷冻液对猪扩张囊胚冷冻效果的影响 实验3、冷冻处理方法对玻璃化猪囊胚冷冻效果的影响 实验4、猪胚胎的移植 猪胚胎冷冻保存技术体系 超数排卵并计划配种 手术采胚 离心 CB处理 OPS冷冻 解冻 移植 13000r/min、13min 配种后6-7天囊胚 7.5μg/ml、30min 入库保存 检测冻后品质 三级保护体系建立 四个保护区 直升镇火烧店社区、漫水村保护区 峰高街道峨眉社区保护区 昌州街道石河村保护区 双河街道高峰村、白云社区保护区 两个保种场（1个国家级） 两个保种场（1个市级） 胚胎、配子冷冻保存库（36 m2） DNA样本库（22 m2） 一个冷冻保存库 为研究荣昌猪基因组、基因结构以及新基因发现等工作奠定了坚实的基础。该文库是我国乃至国际上第一套荣昌猪的BAC文库，是研究我国优良地方品种遗传资源的重要平台。 构建了荣昌猪BAC 文库 BAC文库包含约19.2万个克隆作，平均插入基因组片段为120kb，约覆盖猪全部基因组的7 倍以上。 特色（优势）性状遗传基础研究 荣昌仔猪早期肌肉、脂肪生长规律研究 哺乳仔猪从出生至80日龄，每隔7天跟