红算盘子中三萜类化学成分及其细胞毒活性研究.docVIP

　　红算盘子中三萜类化学成分及其细胞毒活性研究 作者：肖海涛，王跃虎，郝小燕， 杨小生， 郝小江 【摘要】 　　目的研究红算盘子的化学成分及其细胞毒活性。 方法采用多种色谱方法分离纯化，根据理化性质和各种波谱技术进行结构鉴定；用MTT法评价其细胞毒活性。结果从醋酸乙酯部位分离得到6个三萜类化合物，鉴定为算盘子二醇①，羽扇豆-20(29)-烯-3α，23-二醇②，算盘子酮③，表-羽扇豆醇④，3β,19α,23α-三羟基-12-烯-28-齐墩果酸⑤，2β,3β,23α-三羟基-12-烯-28-齐墩果酸⑥。结论以上化合物均为首次从红算盘子中分离得到；其中化合物1 ～4对人肝癌BEL-7402细胞，化合物5，6对非小细胞肺癌A-549细胞具有一定程度的细胞毒作用。 【关键词】 红算盘子 三萜 细胞毒 　　AbstractObjectiveTo study the chemical constituents of Glochidion coccineum and thEir cytotoxicity in vitro.MethodsVarious column chromatographic technologies ethod the part of ethyl acetate and identified as Glochidiol ①, Lup-20(29)-ene-1α,23-diol ②, Glochidone ③, Epi-lupeol ④, 3β,19α,23α-trihydroxy-12-oleanen-28-oic acid ⑤, 2β,3β,23α-trihydroxy-12-oleanen-28-oic acid ⑥.ConclusionThe above pounds this plant for the first time; pounds 1～4 shoan hepatoma (BEL-7402), as a (A-549）cell lines. 　　Key ; Triterpene; Cytotoxicity 　　红算盘子Glochidion coccineum (Buch.-Ham.) Muell. Arg.为大戟科算盘子属植物，又名算盘珠、野南瓜、馒头果等，产于广西、贵州和云南等省区，生于海拔450～1000 m山地疏林或山坡、山谷灌木丛。根、茎、叶和果实均可药用，有清热利湿、活血散淤、消肿解毒之功效，民间常用来 治疗 感冒发热、痢疾、疟疾、急性胃肠炎、消化不良、风湿性关节炎、跌打损伤等症［1］，其化学成分和生物活性研究尚未见报道，而 现代 药理研究表明算盘子属植物中的羽扇豆烷型三萜具有潜在的抗肿瘤、抗病毒作用，引起人们极大的关注［2,3］。为了充分开发和利用算盘子属植物资源，我们对该属植物中的红算盘子进行了化学成分分析和研究，共分离得到二十多种化学成分，其结构类型涉及三萜、倍半萜、木脂素、黄酮等。进一步的药理实验表明，这些化学成分具有不同程度的抗肿瘤和抗氧化活性。本 论文 报道其中的三萜类化学成分。 　　 1 材料与仪器 　　红算盘子(采自贵州贵阳，经贵阳中医学院陈德媛研究员鉴定，为大戟科算盘子属植物红算盘子)。实验所用硅胶（200-300目）和高效薄层层析板（GF254）为青岛海洋化工厂生产；Sephadex LH-20为Amersham Pharmacia Biotech公司生产；核磁共振谱由Bruker AM-400、DRX-500型核磁共振仪测定，TMS为内标；质谱由VG Auto-Spec3000或HP 5973质谱仪测定，电离条件为70eV。 　　 2 方法与结果 　　2.1 提取和分离红算盘子干燥根茎12.0 kg，经粉碎成粗品后，用90 %的乙醇回流提取3次（3 h/次），合并提取液，回收乙醇得浓稠浸膏。用适量水分散，用醋酸乙酯反复萃取得醋酸乙酯萃取物。醋酸乙酯萃取物（201 g）以粗硅胶（80～100目）拌样（比例为1∶1），上硅胶柱（200目），用石油醚-醋酸乙酯梯度洗脱，分为7段。其中第2段经反复硅胶柱层析（石油醚-氯仿梯度洗脱）和制备薄层纯化，共分离鉴定得到化合物1 (6 mg）、2 (221 mg）、3 (232 mg）、4 (26 mg）。第3段经反复硅胶柱层析（石油醚-氯仿，石油醚-丙酮洗脱）、Sephadex LH-20 ［CHCl3-MeOH (1∶1)］ 层析、制备薄层纯化共分离鉴定得到化合物5 (29 mg）和6 (17 mg)。 　　2.2 结构鉴定 　　2.2.1 化合物1白色粉末；Liebermann-burchard 反应呈阳性。ESIMS m/z (%) 907 ［2M + Na］+ (8), 425 (17),408(13),4