血浆内氧化低密度脂蛋白在肺癌和血管损伤性疾病中特异性变化的实验研究.docVIP

　　血浆内氧化低密度脂蛋白在肺癌和血管损伤性疾病中特异性变化的实验研究 作者：韩京军，李星云，尹学哲 【摘要】 目的研究不同种氧化低密度脂蛋白（OX-LDL）在肺癌（Ca）和动脉硬化性血管损伤性疾病（As）病人血液中的特异性变化，探讨不同种氧化低密度脂蛋白与肿瘤及动脉硬化发病之间的相互关系。方法以临床确诊肺癌的16例患者为Ca组，12例患者为As组，选择健康大学生20名作为正常对照组。分别检测血浆内LPO含量、SOD活性及各组氧化脂质的峰线位置。结果Ca组、As 组LPO含量与正常组比较差异有显著性，As组SOD活性与正常组比较差异有显著性；在薄层层析中Ca组、AS与正常组的过氧化低密度脂蛋白分布均有不同。结论Ca与As患者和正常人比较其细胞氧化低密度脂蛋白代谢特征表现为代谢率增强，过氧化低密度脂蛋白具有不同的特异性变化。 【关键词】 氧化低密度脂蛋白； 肺癌； 动脉硬化性血管损伤疾病 　　Abstract：ObjectiveTo study the distinctive change of different peroxidized lo the plasma ethod. The concentrations of LPO and SOD in plasma ined. And the top line positions and the rough concentrations of OX-LDL etabolic rates of OX-LDL can significantly increase more both in Ca group and in As group than in control group, and the specific changes can be observed. 　　Key a公司）,超低温冰箱（日本三洋SIM-F124），高速离心机（德国Heraeus STRATOS HAS 15.94型），超速离心机（瑞士Centrikon T-1055型），层析用自动部分收集器　HELIRAC（瑞士LKB公司）。 　 　2 方法 　　2.1 分组以临床上经过各种检查确定临床诊断的肺癌患者和包括糖尿病的血管损伤性疾病患者作为研究对象，正常对照选择了健康、体检证明肝功能、肾功能、胸部X线及血尿常规均正常的20名大学生自愿者。分组如下：①肺癌组16例，男9例，女7例，年龄为42～68岁，平均51岁；②血管损伤组12例，男9例，女3例，平均年龄47～72岁，平均56岁；③正常组20例，男10例，女10例，年龄21～24岁，平均年龄22岁。 　　2.2 标本制备 　　每人清晨空腹采血16 ml加入乙二胺四乙酸（终端浓度为0.05 mmol/L）抗凝、抗氧化，以3 500 r/min离心提取血浆，在冰箱0℃条件下保存备用。用哈贝尔的重层超速离心分离法，以40 000 r/min离心26 h分离血浆内低密度（d=1.063～1.18），以40 000 r/min离心28 h分离血浆内高密度脂蛋白(d=1.18～1.21)。 　　2.3 血浆内LPO的测定 　　八木别法测定各组血浆的低密度脂蛋白内过氧化脂蛋白含量。 　　2.4 血浆内SOD活性测定 　　用放射免疫法测定各组血浆内超氧化物歧化酶(SOD)的活性。 　　2.5 标本中各种脂类的薄层层析 　　2.5.1 脂类提取 　　取标本0.8 ml（0.6 ml血浆+0.2 ml蒸馏水）加甲醇2 ml，加三氯甲烷1 ml混匀，加醋酸2滴混匀后再加入三氯甲烷1 ml，加蒸馏水1 ml混匀，高速离心2 000 r／min，10 min。吸取下层在真空泵内连续吸引干燥8～12 h。 　　2.5.2 展开液的制作及薄层层析分析 　　展开液由石油乙醚75 ml+乙醚25 ml+乙酸1 ml组成。薄层层析板先用三氯甲烷洗1次，在 自然 条件下干燥12 h后，在层析板上取一边打5个格，用三氯甲烷100 μl溶解脂质在薄层上滴注，以能吸干为度。将层析板放入含有展开液的展开槽中展开，展开至层析板顶部2～3 cm时停止展开，层析板进行显影。 　　2.5.3 显影和摄影 　　析板放入显影槽（碘化）5～10 min后取出进行摄影。初步判定各组氧化脂质的峰线位置和大致浓度。 　　2.6 统计学处理 　　应用SPSS11.5统计软件，数据以±s表示，结果处理使用配对t检验。 　　 3 结果 　　3.1 血浆内LPO测定　 　　如表1所示，正常对照组与血管损伤组比较Plt;0.01，与肺癌组比较Plt;0.05，均具有统计学意义。氧化低密度脂蛋白含量在肺癌组与血管病变组之间有测定数值的变化，但无统计学差异。表1 血管损伤组和肺癌组血浆内LPO测定值（略） 　　3