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第25卷第4期 化学反应工程与工艺 V0l25，No4 2009年 8月 ChemicalReactionEngineeringandTechnology Aug．2009 文章编号：1001--7631(2009)04--0334--05 毕赤酵母提取液还原制备银纳米颗粒 洪露薇 王惠璇 林文爽 杨 欣 李清彪 (厦门大学化学化工学院化学工程与生物工程系 醇醚酯化工清洁生产国家工程实验室， 化学生物学福建省重点实验室。厦f-j 361005) 摘要： 采用毕赤酵母的提取液与银氨溶液反应制备银纳米颗粒 (AgNPs)，并考察了pH值对 AgNPs的 影响 结果表明：酸性条件下，反应速率缓慢，且生成的AgNPs呈多分散性；在一定范围内(pH值小于 12．50)，碱性条件有利于提高反应速率 ，且随着 pH值的提高，AgNPs粒径分布变窄；当 pH值继续提高 (pH值为12．80)，AgNPs发生团聚沉淀。 关键词 ： 银纳米颗粒 ；毕赤酵母 ；生物还原 ：生物制备 中图分类号 ： TQ033 TB383 文献标识码：A 微生物具有合成无机材料的能力 ，如利用趋磁细菌合成磁性纳米颗粒，利用硅藻合成硅材料，利 用S形细菌合成石膏和碳酸钙层等[1]，被称作环境友好 的 “纳米工厂 (nonofactories)”[2。]。利用生 物法合成纳米材料 ，尤其是金属纳米材料，作为一种新型的绿色合成技术得到了广泛的关注。银纳米 颗粒 (AgNPs)由于具有特殊的物理化学性质，在许多领域都有着广阔的应用前景，如作为选择性 吸收太阳能的涂层材料、化学反应催化剂、生物标记或抗菌剂等口 ]。现有 AgNPs的物理合成方 法，如气相冷凝法、紫外光或 射线辐射法 ，生产效率较低且成本高[7]，而化学合成方法多采用硼 氢化物、醇类 、柠檬酸盐 、烷基硫化物和肼等还原银盐 ，具有高成本高能耗的特点，且所用的化学试 剂会对环境造成危害。因此，新兴的生物还原法可能成为合成 AgNPs的绿色方法[9]。已有文献报道 了利用细菌、酵母菌、霉菌等微生物或其提取液合成 AgNPs[g 。细菌胞 内合成的AgNPs大多沉积 在细胞内或细胞周质间隙中，需要利用超声波等技术进行分离[g]。与细菌相比，真菌的蛋白质含量更 高，生产 AgNPs的能力更强[1。。，而且真菌可以进行胞外合成 AgNPs[g]，这使大量合成AgNPs成为 可能，且有利于 AgNPs的下游应用[5]。然而 ，目前用于合成 的丝状真菌 ，如镰刀霉菌 (Fusarium oxysporum)、烟曲霉菌 (Aspergillusfumigatus)，对植物或人 体有致 病 的可能[g]。毕赤酵母 (Pichiapastoris)对生物体没有危害，其菌株易购买，所以本研究选用毕赤酵母制备 AgNPs，以期 为 AgNPs的合成提供合适 的方法 。 1 实验部分 毕赤酵母在酵母浸出粉胨葡萄糖培养基 (YPD)中，在 30℃，转速为 150r／min的摇瓶 中培养 3天 (培养基的质量组成 ：1 酵母膏，2 蛋 白胨 ，2 葡萄糖)，然后在 3500r／min转速下离心分 离 15min，去除培养基以获得毕赤酵母菌体。将湿菌体置于6O℃烘箱中干燥后，研磨成菌粉备用。 取一定量的菌粉 ，按照 100mL水加0．4g菌粉的比例加入去离子水，加热煮沸 5min后停止加 热，室温冷却后过滤去除菌体，取滤液作为制备AgNPs的还原剂。取25mL滤液加入 50mL锥形瓶 中，往滤液中加入250 L新配制 的浓度为0．1mol／L的银氨溶液，使 Ag元素浓度约为 1mmol／L， 收稿 日期 ：2009—02—25：修订 日期 ：2009—07—10 作者简介 ：洪露薇 (1987一)，女，本科生；李清彪 (1963--)，男，博士，教授，博士生导师，通讯联系人 。E-mail：kdqb~(Ⅺnuedu．∞ 基金项 目：国家高技术研究发展计划 (20o7AA03Z347)；国家 自然科学基金 ；福建省 自然科学基金 (2oo8Jo169) 第 25卷第 4期 洪露薇等．毕赤酵母提取液还原制