实验十一血液分析仪的使用及结果分析.ppt.ppt

实验十一 血液分析仪的使用及结果分析 一、三分群型血液分析仪的使用及结果分析 【目的】 掌握三分群型血液分析仪的原理、操作方法、结果分析及参数的临床应用。 【原理】 以电阻抗型仪器为例。 1 ．细胞计数及体积测定 定量血液用等渗电解质溶液（稀释液）按一定比例稀释，血细胞相对于电解质溶液是电的不良导体，当血细胞通过仪器的微孔管时，每个细胞均取代等体积的电解质溶液形成短暂的电阻变化，从而产生一个电压的脉冲变化，相应的脉冲信号经放大、甄别后累加记录。脉冲数量相当于细胞个数，脉冲大小与细胞体积成正相关。数据经计算机处理后得出各类血细胞浓度（包括血小板）、体积大小均数、变异系数、占全血体积的百分比等参数和细胞体积分布直方图等。 2．血红蛋白测定 大多数仪器采用SDS-Hb法测定血红蛋白。被稀释的血液中加入溶血转化液后释放出血红蛋白，与其中的SDS结合形成血红蛋白衍生物，仪器在特定波长下测定光密度，光密度与液体中血红蛋白的含量成正比，通过计算得出全血中血红蛋白浓度。SDS-Hb与HiCN吸收光谱相似，能满足实验的精确性、准确性要求。 3．白细胞分群 标本加入特殊的溶血剂，破坏红细胞的同时，使白细胞膜表面产生小孔，细胞失水而皱缩，皱缩后的细胞大小实际上是细胞核与胞质中颗粒成分及细胞膜的总和，与自然体积无关，并使各种类型的白细胞之间的体积差异增大，以便于各种白细胞的分群。血液分析仪根据改造后细胞体积的大小，将范围为35～450fl的白细胞分成大、中、小三个群体，并显示出体积分布直方图。根据各群面积占总体面积的比例，计算出白细胞各亚群的百分率和绝对值。 4． 参数 通过计算得出。 【操作】 1．标本准备 2．准备仪器 3．测定质控物 4．测定血液标本 5．结果报告 【注意事项】 1．环境要求 血液分析仪属高精度设备，室内温度应保持在15℃～25℃之间，相对湿度应＜80%。防止电磁波干扰，不能使用磁饱和稳压器，仪器应有良好的接地装置。 2．抗凝剂 使用ICSH推荐的EDTA-K2，抗凝剂终浓度为（1.5～2.2）mg/ml血。不能使用肝素抗凝剂，肝素影响白细胞和血小板的测定。 3．采血要求 操作顺利，抗凝迅速而且完全，标本中不能有小凝块和纤维蛋白丝。特别是使用末梢血，血液的采集和稀释过程是影响数据准确性的重要因素。 4．特殊标本 肝病病人和新生儿的红细胞对溶血剂有很强的抵抗作用，可导致白细胞计数结果的假性偏高和血红蛋白测定结果的假性偏低。有些白血病当白细胞数量过多时应校正RBC测定值，同时过多的白细胞也会干扰血红蛋白测定的光密度。 5．稀释液、溶血液 最好使用与仪器型号对应的原装试剂，兼容试剂使用前要进行对照试验，所有试剂一定要在有效期内使用。 6．测试要求 标本应于4h内在血液分析仪上测试完毕，最长不宜超过6h，其间血液标本置于室温，不宜在冰箱保存。测定过程中仪器有故障报警时应查找原因，消除警告，重新测试。有提示信息要注意分析提示内容，具体分析所测数据是否可用。试剂废液桶要低于仪器，以免废液返流到真空管中，损坏设备。 7．仪器要求 血液分析仪的型号众多，原理、试剂、操作过程及要求不尽相同，要熟悉仪器性能，严格按照操作手册进行操作和维护、保养。新安装的或维修过的旧仪器一定要进行校准和性能评价后才可用于临床样本分析。 8．质量控制要求 血液分析仪一旦出现问题将可能造成整批错误，因此必须进行室内质量控制和参加室间质评活动。 二、五分类型血液分析仪的使用及结果分析 【目的】掌握五分类型血液分析仪的原理，熟悉其操作方法、结果分析及参数的临床应用。 【原理】 1．细胞计数及体积测定 同三分群血液分析仪。 2．血红蛋白测定 同三分群血液分析仪。 3．白细胞五分类计数 白细胞五分类原理比较复杂，不同型号的仪器所采用的技术也不尽相同，但目的都是尽可能精确的把五种类型白细胞分离开。 4．网织红细胞计数与分类 荧光染料（如吖啶橙、哌若宁-Y、噻唑橙、碱性槐黄O）能与网织红细胞内RNA结合，单个通过特定波长的检测激光束时发出荧光，根据发荧光细胞的数量可精确测定网织红细胞占成熟红细胞的百分率（RET％）。用激发的荧光强度（反映细胞内RNA的含量）和前向散射光强度（反应细胞大小）分别作为X轴和Y轴两个变量描记二维坐标散点图，由此坐标区分出标本中PLT、RBC和RET的区域。根据荧光强度可将网织红细胞分成低荧光强度网织红细胞（LFR）、中等荧光强度网织红细胞（MFR）和高荧光强度网织红细胞（HFR）三类。 【操作】 1．熟悉仪器的正确使用方法 2．开启电源 3．检测空白本底 4．测定质控