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《环境工程微生物学》课程实验教学大纲 [适用对象] 环境科学专业 [实验学时] 18 学时 一、实验教学任务和目的 《环境工程微生物学实验》是与《环境工程微生物学》理论课程密切结合的一门重要的、非单独设课的环境科学专业基础实验课程。课程学习的目的是让学生掌握本课程基本技能操作，为学习基础环境科学有关课程和为学生将来从事环境相关工作和科研工作奠定基础。 二、实验教学基本要求 （1）训练学生掌握环境微生物学最基本的操作技能。 （2）加深理解课堂讲授的某些环境微生物学理论。 （3）培养学生观察、思考、分析问题、解决问题和提出问题的能力。 （4）培养学生实事求是、严肃认真的科学态度，以及敢于创新的开拓精神。 （5）培养学生树立勤俭节约、爱护公物的良好作风。 三、实验教学内容 实验一 细菌的人工培养法 1、实验目的和要求 （1）掌握各种培养基接种技术。 （2）熟悉细菌在培养基中的生长现象；认识菌落、菌苔。 （3）了解常用的液体、固体和半固体培养基的成分、制备方法和用途。 2、实验内容 （1）培养基的配制，摆斜面，倒平板 （2）分离培养法(平板划线法) （3）斜面培养基接种方法 （4）液体培养基接种法 （5）半固体培养基的接种法 （6）观察细菌在培养基上的生长情况：细菌各种培养物的示教；描述细菌在各种培养基上的生长现象；观察大肠杆菌与痢疾杆菌在半固体培养基上的现象。 3、实验仪器 普通琼脂平板，普通琼脂斜面，半固体培养基，肉汤培养基，接种环，接种针，酒精灯，大肠杆菌24小时斜面培养物等。 4、实验学时 3学时 实验二 细菌的分布及消毒与灭菌 1、实验目的和要求 掌握高压蒸气灭菌器的使用方法及注意事项；证实热力和紫外线的杀菌效果；证实常用消毒剂的消毒效果；证明细菌在自然界和正常人体的存在，为在微生物学实践中树立严格的“无菌观念”提供依据。 2、实验内容 （1）高压蒸气灭菌法 （2）干热灭菌器（干烤箱） （3）紫外线的杀菌实验 （4）热力对芽胞及繁殖体的作用 （5）药物敏感性试验 （6）化学消毒剂的杀菌的作用———手指皮肤消毒前后的细菌学检查 （7）空气中的细菌检查 （8）污水和净水中的细菌数检查 （9）皮肤表面的细菌检查 3、实验仪器 普通琼脂平板、1％高层琼脂，血琼脂平板，无菌试管，无菌吸管，无菌平皿，灭菌棉签，咽拭子，酒精灯等。 4、实验学时 3学时 实验三 细菌形态与结构的检查法 1、实验目的和要求 （1）学会显微镜油镜的使用和保护方法。 （2）认识细菌的基本形态和特殊结构(荚膜、鞭毛、芽胞)。 （3）掌握革兰氏染色方法 （4）了解细菌的动力 2、实验内容 （1）显微镜油镜的使用 （2）观察细菌的形态结构 （3）动力试验 （4）革兰氏染色 3、实验仪器 标本有葡萄球菌、绿脓杆菌的琼脂斜面18～24小时培养物；染色液有结晶紫、碘液、95％酒精、稀释石炭酸复红；显微镜、酒精灯等。 4、实验学时 3学时 实验四 微生物细胞数的计数 1、实验目的和要求 了解血球计数板的结构，掌握使用和计算方法。 2、实验内容 用血球计数板计算血细胞或酵母菌的数量。 3、实验仪器 显微镜，血球计数板，移液管，酵母菌液（或血细胞）。 4、实验学时 3学时 实验五 微生物大小的测定 1、实验目的和要求 掌握用显微镜测微尺来测定微生物大小。 2、实验内容 利用显微镜测微尺来测量微生物大小。 实验仪器 目测微尺、物测微尺和微生物 4、实验学时 3学时 实验六 土壤微生物的分离和观察 1、实验目的和要求 掌握分离土壤微生物的试验技术。 2、实验内容 土壤样品的采集，接种，培养，纯培养分离，简单染色或革兰氏染色，用油镜检查微生物的形态。 实验仪器 平板，锥形瓶，移液管，接种环，显微镜。 4、实验学时 3学时 四、实验项目与学时分配 实验项目与学时分配表 序号 项目名称 学时 实验要求 实验类型 主要仪器设备 1 细菌的人工培养法 3 必做 验证性实验 温箱 2 细菌的分布及消毒与灭菌 3 必做 验证性实验 超净工作台、高压锅 3 细菌形态与结构的检查法 3 必做 验证性实验 显微镜 4 微生物细胞数的计数 3 必做 验证性实验 温箱 5 微生物大小的测定 3 必做 验证性实验 显微镜 6 土壤微生物的分离和观察 3 必做 设计性试验 温箱、超净工作台 五、实验考核办法与成绩评定 实验考核以考勤，实验报告书写作为评分依据，成绩占课程总成绩的20%。 六、实验教材及参考书 周群英，高廷耀主编·环境工程微生物学·北京：高等教育出版社，2000。 七、说明 环境科学专业《环境工程微生物学》课程，在我院是54个学时（其中理论36个学时，实验18个学时）。需要开展的实验很多，在有限的时间内我们根据专业特点选择一些具有代表性的