螺旋体及检验.doc

怀化医专《微生物学检验》教案 编号： 2010年上学期 授课教师 桂 芳 教研室主任审核签名 李争鸣 教学课题 螺旋体及检验 课时 授课时间 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 2 星期 星期 星期 星期 星期 星期 授课对象 检验专业 班级 目的要求 【掌握】钩端螺旋体，梅毒螺旋体的生物学特性和微生物学检验。 【熟悉】1、回归热螺旋体和伯氏疏螺旋体的特性。 2、各类螺旋体的致病与免疫性。 【了解】 防治原则和其他螺施体。 教学重点及难点 重点：1、螺旋体的概念与特征 2、钩端螺旋体的主要生物学性状及微生物学检验 3、梅毒螺旋体的主要生物学性状及微生物学检验 难点： 钩端螺旋体、梅毒螺旋体的微生物学检验。 教法与 学法 讲授法 课型 理论课 教学手段 多媒体 教学 内容 与 时间 分配 1、概述：主要特点及分类。（10min） 2、钩端螺旋体：形态染色、培养、抗原构造与分类。致病性与免疫性，微生物学检查及防治原则。（35min） 3、梅毒螺旋体：形态染色、培养特性、抗原构造。致病性与免疫性，微生物学检查及防治原则。（35min）《》人卫出版社 2007年(spirochete) 螺旋体是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。生物学地位介于细菌与原虫之间。 有细胞壁、原始核，以二分裂方式繁殖，对抗生素敏感等。 其中致病性螺旋体主要有钩端螺旋体属、疏螺旋体属、密螺旋体属等3个属。 第一节 钩端螺旋体 （Leptospira） 有2种：问号钩端螺旋体——人畜共患病；双曲钩端螺旋体——不致病。 一、生物学性状 1. 形态染色 螺旋细密、规则，形似细小珍珠排列的细链。一端或两端呈钩状，故名钩端螺旋体。运动活泼，常使菌体呈C、S或8字型。 G-，但不易着色。常用Fontana镀银染色法，被染成棕褐色。暗视野显微镜下可见活泼运动、折光性强而成白色的钩端螺旋体。 2.培养特性 需氧或微需氧，营养要求高，常用Korthof培养基，其中含10%新鲜灭活兔血清或牛血清，蛋白胨和磷酸盐缓冲液（血清除促进钩体生长外，还可中和其产生的毒性）。 适宜生长温度为28-30℃，若11-13℃能生长的为非致病的双曲钩端螺旋体。最适pH7.2-7.6，pH 6.5死亡，最高能耐pH8.4。 在人工培养基中生长缓慢： 液体培养基：28℃培养1-2周，液体培养基呈半透明云雾状生长。 1%琼脂固体：28℃1-3周，可形成透明、不规则，d 2mm的扁平小菌落 。 生化反应不活泼，不分解糖类和蛋白质，有过氧化氢酶，有的菌株可溶血。 3.抵抗力 对热和酸抵抗力弱，60℃1min即死亡。0.2%来苏、1:2000升汞、1%石炭酸经10~30 min被杀灭。对青霉素敏感。 在夏秋季酸硷度中性的湿土或水中可存活20天以上，甚至数月之久，这在本菌的传播上有重要意义。 4. 抗原构造与分类 1）属特异性抗原（菌体抗原）：脂多糖复合物，用于分群。 2）型特异性抗原（表面抗原）：多糖蛋白复合物，用于分型。 问号状钩端螺旋体至少可分为25个血清群、273个血清型。 我国已发现的致病性钩端螺旋体至少有19个血清群、74个血清型，是发现血清型最多的国家。 二、致病性与免疫性 1、致病物质 ?（1） 内毒素样物质(ELS)或称脂多糖样物质(LLS) ?（2） 溶血素：溶解红细胞，引起贫血、出血、肝肿大、黄疸、血尿。 ?（3） 细胞毒性因子(CTF)：引起小鼠肌肉痉挛、呼吸困难而死亡。 ?（4）细胞致病作用(CPE)物质：56℃经30分钟被破坏。注射入家兔，可形成红斑和水肿。 2、所致疾病 钩端螺旋体病（一种人畜共患传染病）。 储存宿主：鼠和猪，其他：50多种动物（蛇、鸡、鸭、鹅等） 传播途径：人与污染水或土壤接触,经粘膜或破损皮肤进入;经胎盘垂直传播. 临床表现：大多隐性感染，随尿排出。轻重程度与感染钩体型别、毒力、免疫性有关。轻者似感冒，重者引起内脏器官和神经系统的损害。先形成钩体血症,进入损伤全身毛细血管内皮细胞及肝、肾、肺心及中枢神经。 疾病特点：起病急、高热、乏力、全身酸痛、眼结膜充血、腓肠肌压痛、表浅淋巴结肿大。 免疫性：疾病后可获得抗同型钩体的持久免疫力。细胞免疫为主。 三、微生物学检查法 （一）标本采集 钩端螺旋体可从临床标本、携带者和自然界的水中分离获得。 标本包括血液、尿和脑脊液，发病早期(10天内)血液的阳性率高，2周后尿和脑脊液等的阳性率高。感染6～10天取血可检出抗体，在病程第3或4周达最高水平，此后抗体水平逐渐下降，血清学诊断则需