防己渗漉工艺的优选研究.docVIP

　　防己渗漉工艺的优选研究 【摘要】 　　目的研究防己渗漉提取的最佳工艺。方法以防己总碱和粉防己碱为考察指标，采用正交实验法对防己的渗漉工艺进行研究。结果确定了最佳工艺条件为浸渍24 h，60%乙醇6倍量渗漉，渗漉速度为快速。结论工艺合理可行，可应用于生产。 【关键词】 防己 渗漉 正交实验 总生物碱 粉防己碱 　　Abstract：ObjectiveTo study the optimum percolation conditions for Radix Stephaniae Tetrandrae.MethodsThe percolation process of Radix Stephaniae Tetrandrae um percolation conditions for Radix Stephaniae Tetrandrae e of soak l·min-1·kg-1，and the volume of solvent es. ConclusionThe method is reasonable and feasible，and can be applied to batch production. 　　Key l，自制。 　　防己，购于成都市荷花池药材市场，产地：浙江，含粉防己碱1.13%；粉防己碱对照品，含量测定用，批号0711-20005， 中国 药品生物制品检定所产品；乙醇，医用，95%，购于宜宾保康药业泸州分公司；其余试剂均为分析纯。 　　 2 方法与结果 　　2.1 方案设计经验及预实验结果表明，渗漉工艺的主要影响因素为乙醇浓度、浸泡时间、乙醇倍数、渗漉速度等，故选定以上4个考察因素，每个因素设三水平，以防己总碱、粉防己碱的提取率为评价指标（权重系数均为0.5），按L9(34)正交表实验，表头设计见表1。表1 因素水平（略） 　　称取防己粗粉100.0 g，加入1倍量相应浓度的乙醇，搅拌均匀，密闭放置2 h,待药粉充分膨胀和润湿后，装筒，按《中国药典》2005年版渗漉法［1］实验，加入相应浓度的乙醇，浸泡12～48 h，开始渗漉，流速1～5 ml·min-1·kg-1，收集相应量的渗漉液，并用相同浓度的乙醇定容到1 000 ml，得样品液（含生药0.1 g/ml）。 　　2.2 总生物碱的含量测定 　　2.2.1 贮备液的制备精密称取5 mg粉防己碱对照品，至10 ml容量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀（0.496 mg/ml）。 　　2.2.2 最大吸收波长的选择精密称取粉防己碱对照品1 mg，置25 ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，精密吸取0.2 ml，置10 ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀。采用紫外分光光度法，在波长200～400 nm处进行扫描，结果见图1。粉防己碱的最大吸收波长为282 nm。 　　2.2.3 标准曲线的绘制分别精密量取贮备液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2 ml，置10 ml容量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀。以乙醇为空白，在282 nm处测定吸收度，根据测定结果绘制标准曲线，并求得回归方程：A=12.949 309C-0.063,相关系数r=0.999 98。 　　2.2.4 样品的测定分别精密量取样品溶液5 ml,置100 ml烧杯中，水浴蒸干，残渣加混合溶剂（乙醚：氯仿：乙醇：10%氨水，25∶8∶2.5∶1）40 ml，搅拌后浸泡10 min，超声处理10 min，放置片刻，倾滤，残渣用混合溶剂洗涤3次，5 ml/次，滤液水浴蒸干，残渣用乙醇溶解并定容至25 ml，精密量取上述溶液1 ml，置10 ml容量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，以乙醇作空白，于282 nm处测定吸收度， 计算 总生物碱含量。结果见表2。 　　2.3 粉防己碱含量测定 　　2.3.1 色谱条件色谱柱为Dikma Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈∶甲醇∶0.06%二乙胺溶液（60∶20∶20），检测波长282 nm，流速1.0 ml/min,进样量10 μl。 　　2.3.2 对照品溶液的制备精密称取粉防己碱对照品10mg，置10ml棕色量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀（1mg/ml）。 　　2.3.3 供试品溶液的制备精密量取样品液10 ml，置50 ml蒸发皿中，水浴蒸干，残渣，用流动相溶解，转入25 ml量瓶，加流动相至刻度，摇匀，离心，取上清液，0.22 μm滤膜过滤。 　　2.3.4 标准曲线的制定取上述对照品溶液用流动相稀释，制备成每毫升含0.05，0.10，0.25，0.50，0.75，1.00 mg粉防己碱的系列标准溶液，按上述色谱条件分别进样5 μl，以粉防己碱的峰面积A为纵坐标，浓度C为横坐标作图，