土壤微生物生态学研究方法进展_3百替生物.pdfVIP

土 壤 与 环 境 2002, 11(2): 167~171 SoilandEnvironmentalSciences E-mail:ses@ 土壤微生物生态学研究方法进展 蔡燕飞，廖宗文 华南农业大学资源环境学院，广东 广州 510642 摘要：土壤微生物研究方法经历了微生物纯培养、土壤酶活性（BIOLOG微平板分析）、微生物库（如微生物生物量） 和流（C和N循环）、微生物生物标记物（FAMEs）、微生物分子生物学技术（从土壤中提取DNA，进行PCR-DGGE、 PCR-SSCP、RLFP分析等），揭示了土壤微生物群落丰富的多样性和生态功能；现代生物技术和传统微生物研究方法的 配合将为土壤微生物学研究提供较好的前景。 关键词：土壤微生物生态；酶；微生物生物量；生物标记物；分子生态 中图分类号：S154.3 文献标识码：A 文章编号：1008-181X（2002）02-0167-05 土壤微生物学最本质的问题是微生物生态学的 生物研究的一个致命弱点是不能直接的反映土壤实 问题。本文旨在对这领域的研究作个回顾，介绍一 际微生物状况。Visser 等对酶检测用于土壤微生物 [5] Skujins(1978) 些新方法，对将来土壤微生物研究作出展望。 群落和土壤质量评价提出了怀疑 。 1 微生物纯培养 认为脱氢酶本身的生物化学特征决定了它不可能以 [6] 传统的土壤生态系统中微生物群落多样性及结 胞外酶状态存在于土壤中 。为了解决土壤酶测定 构分析大多是将微生物进行分离培养，然后通过一 中的评判问题，Beck（1984）提出了土壤微生物如 般的生物化学性状，或者特定的表现型来分析，局 微生物量（microbialbiomass）、还原酶（reductase）、 限于从固体培养基上分离微生物。随着人们对土壤 水解酶（hydrolase）的适宜指标，然而，这些指标 中微生物的原位生存状态研究，越来越发现常规的 从来没有被广泛采用。Beck（1984）和Trasar-Cepeda etal. 1998 分离培养方法很难全面地估价微生物群落多样性。 （ ）认为把酶用于土壤质量评价指标是值 从土壤中简单提取和平板培养计数不能得到土壤微 得怀疑的，而且缺乏常规可行的酶测定手段，存在 ， [1] [7 8] 生物在土壤生态系统中的生活特征和生态功能 的 药品昂贵等问题 。 信息。纯培养方法和原理大多从医药微生物引过来 Community-level physiological profiling (CLPP) Garland and Mills 1991 的，有些方法对土壤微生物研究并不很适合，譬如 是由 （ ）提出的另一种酶分 [9] 95 在自然土壤生态环境下许多土壤微生物处于贫营 析方法 ，微生物群落降解 种不