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1第一章 分光光度分析汇
分光光度分析的基本原理
分光光度分析的样品前处理
分光光度分析的条件选择
分光光度计的基本构造和使用流程
分光光度分析法
分光光度计的维护与保养
数据处理—线性回归分析法简介;学习要求
1、掌握紫外-可见分光光度分析的特点、基本原理、测定条件的选择、测定实验技术、定性和定量分析方法及有关术语。
2、掌握紫外-可见分光光度计的结构,使用、维护和保养方法。; 基于物质光学性质而建立起来的分析方法称之为光学分析法,分为:光谱分析法和非光谱分析法(如比色法、旋光测定法)。
光谱分析法是指在光(或其它能量)的作用下,通过测量物质产生的发射光、吸收光或散射光的波长和强度来进行分析的方法。 ; 在光谱分析中,依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法,按所用光的波长不同分为:
原子吸收光谱:利用物质的气态原子对特定波长的光的吸收来进行分析的方法。
红外吸收光谱:分子振动光谱,吸收光波长范围2.5?1000?m (红外光区),主要用于有机化合物结构鉴定和定量分析。
紫外吸收光谱:电子跃迁光谱,吸收光波长范围200?400nm(近紫外区) ,可用于结构鉴定和定量分析。
可见吸收光谱:电子跃迁光谱,吸收光波长范围400?760nm (可见光区),主要用于有色物质的定量分析。
本章主要讲授紫外-可见吸光光度法。;第一节 分光光度分析的基本原理; 白光( 400 -760 nm,日光、白炽灯光等)是一种复合光,它是由各种颜色的光按一定比例混合而得的。利用棱镜等分光器可将它分解成红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等不同颜色的单色光。 ;白光除了可由所有波长的可见光复合得到外,还可由适当的两种颜色的光按一定比例复合得到。能复合成白光的两种颜色的光叫互补色光。; 当白光照射到物质上时,如果物质对白光中某种颜色的光产生了选择性的吸收,则物质就会显示出一定的颜色。物质所显示的颜色是吸收光的互补色。;2、透射比(透过度、透光率)T和吸光度; 布格尔(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系:A∝l ; A=lg(I0/It)= klc
A:吸光度,描述溶液对光的吸收程度;
l:液层厚度(光程长度),通常以cm为单位;
c:溶液的浓度,单位g·L-1
k:吸光系数,单位L·g-1·cm-1 ; A=lg(I0/It)= εl c
式中
c:溶液的物质的量浓度,单位mol·L-1;
ε:摩尔吸光系数,单位L·mol-1·cm-1;; 朗伯—比耳定律是吸光光度法的理论基础和定量测定的依据。应用于各种光度法的吸收测量; ; 标准曲线法测定未知溶液的浓度时,发现:标准曲线常发生弯曲(尤其当溶液浓度较高时),这种现象称为对朗伯—比耳定律的偏离。 ;(1)单色光不纯引起的偏离
实际上,分光光度计只能获得近乎单色的狭窄光带。复合光可导致对朗伯—比耳定律的正或负偏离。;(3)与测定溶液有关的因素
朗伯—比耳定律的假定:所有的吸光质点之间不发生相互作用。这只有在稀溶液(c0.01mol/L)时才基本符合,当溶液浓度较高时,吸光质点间可能发生缔合等相互作用,直接影响了对光的吸收。故朗伯—比耳定律只适用于稀溶液。
溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化学平衡时,使吸光质点的浓度发生变化,影响吸光度。;分光光度法主要应用于测试样中微量组分,与滴定分析、重量分析法相比,有如下特点:
1、灵敏度高 下限一般可达10-4-10-7g/mL
2、准确度高 相对误差1-3%
3、操作简便
4、测定快速
5、有一定的选择性
6、仪器简单;例题 :已知某化合物的相对分子量为251,将此化合物用已醇作溶剂配成浓度为0.150 m mol / L溶液,在480nm处用2.00cm吸收池测得透光率为39.8%,求该化合物在上述条件下的摩尔吸光系数和吸光系数。;第二节 分光光度分析的样品前处理;第三节 分光光度分析的条件选择;吸收曲线的讨论;(5)在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大,所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。;Evaluation only.
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