猪病检验报告.docVIP

猪病检验报告 ：检验报告 猪病 检验报告有效期几年 产品型检验报告图片 血清检验报告图片 篇一：常见猪病检测方法 猪病诊断技术规范 一、致病性大肠杆菌的检测 1 引用标准 参考NY/T 555-2002（动物产品大肠杆菌、粪大肠菌群和大肠杆菌的检测方法）。 2 范围 适用于猪大肠杆菌病的诊断。 3 检测方法 3.1 材料 3.1.1 营养肉汤 3.1.2 营养琼脂 3.1.3 EMB 3.1.4 TSI 3.1.5 IMViC生化鉴定管 3.1.6 小白鼠 3.2 分离培养 a) 将采集的肝、脾、心血或肠内容物等分别接种伊红美兰琼脂平板（同时接种营 养肉汤增菌备用），置37 ℃培养18~24 h。 b) 观察培养特性，挑取黑色有金属光泽的菌落，用该菌落涂片，革兰氏染色，镜 检。 c) 如可见到两端钝圆并多以单个存在的革兰氏阴性粗短杆菌，应取5~10个典型菌 落再接种于TSI琼脂。 d) 同时挑取典型菌落接种营养琼脂，37 ℃培养16~18 h的菌液用于生化特性鉴定。 3.3 生化鉴定 挑取上述菌落纯培养物接种以下生化培养基和乳糖发酵管，(36±1) ℃培养24 h后观察结果。 3.3.1 靛基质试验： a) 滴加Kovacs氏靛基质试剂0.1 mL于靛基质试验培养基中混合，观察结果。 b) 出现红色环的为反应阳性；出现黄色环的为反应阴性。 3.3.2 甲基红（MR）试验 a) 滴加甲基红指示剂0.2 mL于MR-VP培养基中混合，观察结果。 b) 出现红色为阳性反应；出现黄色为阴性反应。 3.3.3 VP试验 a) 滴加VP试剂甲液0.2 mL于MR-VP培养基中混匀，再滴加VP试剂乙液0.1 mL 混匀，静置，观察结果。 b) 在15 min内出现红色的为阳性反应；无颜色变化的为阴性反应。阴性结果1 h 后再观察一次，出现红色也为阳性反应。 3.3.4 枸橼酸盐试验：观察培养基颜色变化，出现蓝色为阳性反应；不变色为阴性反应。 3.4 大肠杆菌鉴定结果 应符合表1要求。 表1 大肠杆菌鉴定结果 出现表1的生化反应类型时，如果为组织样品，由此可初步报告为致病性大肠杆菌。如果为粪便，尿液，饲料，饮水，应进一步做致病性试验。 3.4 致病性试验 a) 取经营养肉汤37 ℃培养16~18 h后的纯化菌株培养液，分别腹腔接种体重20g 左右的小白鼠，每株接种2~3只，每只0.3 mL（含菌量约为1×1012 cfu／mL），同时用相同数量的小白鼠接种无菌肉汤作对照。 b) 饲养观察、记录死亡数，并从死亡鼠的心、肝中回收接种菌。在24小时内出现 死亡的可报告为致病性大肠杆菌。 4 药敏试验 a) 挑选琼脂平板上典型菌落接种营养肉汤培养中，37 ℃培养16~18 h，菌液用于 药敏试验。 b) 将肉汤培养物（用标准比浊管比较达相同浊度）稀释至含菌量为1×109 cfu／ mL，摇匀后蘸取菌悬液均匀涂布于琼脂平板上，然后用无菌镊子将药敏片贴附其上，每纸片2~5张，置37 ℃培养24 ｈ后观察。 c) 根据抑菌圈大小来判定其对药物的耐受性，选择敏感药物。 二、沙门氏菌的检测 1 引用标准 参考NY/T 550-2002（动物和动物产品沙门氏菌检测方法）。 2 范围 适用于猪沙门氏菌病的诊断。 3 检测方法 3.1 材料 3.1.1 SC 3.1.2 DHL 3.1.3 TSI 3.1.4 赖氨酸脱羧酶（LD） 3.1.5 邻-硝基酚-β-D-半乳糖苷（DNPG） 3.1.6 甘露醇糖发酵管 3.2分离培养 a) 采集疑似病例的肝、脾、心血或肠内容物样品。 b) 无菌剪取肝、脾样品1 g，投入10 mL SC增菌液中（血液、粪便样品可以采适 量直接投入10 mL增菌液），36±1 ℃培养18~24 h。 c) 取一接种环增菌液划线接种于DHL琼脂平板上，36±1 ℃培养18~24 h。观察 平板上菌落生长形态。沙门氏菌在DHL平板上呈无色半透明，产硫化氢（H2S），菌落中心黑色或几乎全黑色。 3.3 生化鉴定 a) 挑取DHL平板上可疑菌落3~5个，每个菌落先洗入TSI培养基冷凝水中，继 而在斜面上划线接种并高层穿刺接种。 b) 再挑取同一菌落依次接种氨基酸脱羧酶发酵试验（LD）和ONPG，甘露醇糖 发酵管三支生化管，若菌落偏小，二次挑取菌落有困难，可用接种环醮取TSI培养基中冷凝水接种其余生化管，36±1 ℃培养18~24 h（挑取菌落后的平板，应置于4 ℃冰箱保留48 h以备复查）。 c) 按表1记录反应结果，对照表2进行判定。 d) 凡符合表2生化反应模式，可报告为沙门氏菌。 表1 生化反应结果判定 表2 生化检测沙门