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中药材知母中皂苷类成分分析
中药材知母中有效成分分析概述;药材概述;知母·概述;皂 苷;;;甾体皂苷:
1、苷元结晶性好,易溶于甲醇、乙醇、氯仿、乙醚等有机溶剂
2、皂苷多为无定性粉末,易溶于热水,稀醇
3、均具有旋光性,多为左旋
4、具有溶血性
5、皂苷的乙醇溶液可与甾醇形成难溶的分子复合沉淀物
6、颜色反应:L-B,R-H反应可与三萜皂苷进行区分;2010版药典中中药知母TLC鉴别;香草醛(3-甲氧基-4-羟基苯甲醛)-浓硫酸显色剂
是薄层色谱广泛使用的一种通用显色剂
应用:在挥发油、萜类、甾类和皂苷等中药成分的薄层分离中,多能显示出颜色各异的斑点
未改进配制:含有1%香草醛的浓硫酸溶液
缺点:粘度高
喷显困难,往往使显色点呈“花斑状”,模糊不清
易将薄层表面喷散,对薄层扫描定量影响很大
改进方法:将浓硫酸中加入一定量的水以降低其粘度
结果:70%或60%的硫酸配置的显色剂,对样品显色的灵敏度、显色速度和呈色稳定性与浓硫酸配制基本相同。
现配制方法: 1g的香草醛加到60%的硫酸100ml中(1%)
15g香草醛+250ml乙醇+2.5ml浓硫酸(5%)
5g香草醛,用10%硫酸乙醇100ml(无水乙醇) (5%)
;知母总皂苷老鼠灌胃;样品前处理:30ul血浆样本,文献用量
提取:乙腈蛋白质沉淀法
流动相选择:乙腈 ∶ 1 mmol·L-1乙酸铵溶液( 30:70,V :V)
色谱柱:
Agilent Zorbax SB-C18 柱( 4. 6 mm × 150 mm,5 μm)
峰型好,分离度佳
分析时间长
AlltimaHP C18 柱( 2. 1 mm × 50 mm,5 μm)
良好峰型
缩短分析时间:t(知母皂苷 B-Ⅱ)=1.78min
t(重楼皂苷,内标)=1.96min
分析周期3min;含量测定;HPLC-ELSD;显色剂-UV;目的:通过制备菝葜皂苷元多克隆抗体,建立ELISA 分析方法,对知母药材中的总皂苷进行了含量分析;菝葜皂苷元
(SAR);参考文献:
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