第4章_.ppt

* gou 膜脂的4种运动方式 脂质体 脂 质 体 的 应 用 研究膜脂与膜蛋白及其生物学性质； 脂质体中裹入DNA可用于基因转移； 在临床治疗中,脂质体作为药物或酶等载体 三、膜蛋白 （一）类型 外在(外周)膜蛋白：水溶性蛋白,靠离子键或其它弱键与膜表面的蛋白质分子或脂分子结合，易分离（通过改变溶液的离子强度或温度即可）。 脂锚定蛋白：共价结合脂肪酸或糖脂，插入磷脂分子层 内在（整合）膜蛋白 ：水不溶性蛋白，以非极性氨基酸与脂双分子层的非极性区相互作用而紧密结合在质膜上 ，需用去垢剂使膜崩解后才可分离。 蛋白与膜的结合方式①、②整合蛋白；③、④脂锚定蛋白；⑤、⑥外周蛋白 （二）内在蛋白与膜脂的结合方式 1.膜蛋白的跨膜结构域与脂双层分子的疏水核心的相互作用。 1至多个疏水的α螺旋形成跨膜结构域。 β折叠片组成β折叠片桶(β barrel)，形成亲水通道 。 2.跨膜结构域两端携带正电荷的氨基酸残基与磷脂分子带负电的极性头形成离子键，或带负电的氨基酸残基通过 Ca2+、Mg2+等阳离子与带负电的磷脂极性头相互作用。 3.某些膜蛋白在细胞质基质一侧的半胱氨酸残基上共价结合脂肪酸分子,插入脂双层之间,进一步加强膜蛋白与脂双层的结合力,还有少数蛋白与糖脂共价结合。 去垢剂 去垢剂是一端亲水一端疏水的两性小分子,是分离与研究膜蛋白的常用试剂。 离子型去垢剂(SDS)和非离子型去垢剂（Triton X-100）。 非离子型去垢剂对蛋白的作用比较温和。 The structures of two commonly used detergents. SDS is an anionic detergent, and Triton X-100 is a nonionic detergent. The hydrophobic portion of each detergent is shown in green, and the hydrophilic portion is shown in blue. Solubilizing membrane proteins with a mild detergent. The detergent disrupts the lipid bilayer and brings the proteins into solution as protein-lipid-detergent complexes. The phospholipids in the membrane are also solubilized by the detergent. 第二节 生物膜基本结构与功能 一、膜的流动性 （一）膜脂的流动性影响膜脂流动性的因素 影响膜流动的因素主要来自膜本身的组分，遗传因子及环境因子等。包括： 胆固醇：胆固醇的含量增加会降低膜的流动性。 脂肪酸链的饱和度：脂肪酸链所含双键越多越不饱和，使膜流动性增加。 脂肪酸链的链长：长链脂肪酸相变温度高，膜流动性降低。 卵磷脂/鞘磷脂：该比例高则膜流动性增加，是因为鞘磷脂粘度高于卵磷脂。 其他因素：膜蛋白和膜脂的结合方式、温度、酸碱度、离子强度等。 （二）膜蛋白的流动性 主要有侧向扩散和旋转扩散两种运动方式。 可用荧光漂白技术和细胞融合技术检测侧向扩散。  膜蛋白的流动性受多种因素影响；细胞骨架不但影响膜蛋白的运动，也影响其周围的膜脂的流动。膜蛋白与膜脂分子的相互作用也是影响膜流动性的重要因素。 膜蛋白的运动 荧光标记的小鼠细胞和人细胞融合实验示意图 荧光漂白恢复技术 Four ways in which the lateral mobility of specific plasma membrane proteins can be restricted. The proteins can self-assemble into large aggregates (such as bacteriorhodopsin in the purple membrane of Halobacterium) (A); they can be tethered by interactions with assemblies of macromolecules outside (B) or inside (C) the cell; or they can interact with proteins on the surface of another cell (D). 膜蛋白的流动性的几种限制 思考：膜的流动性有何生物学意义？ 质膜的流动性是保证其正常功能的必要条件。例如跨膜物质运输、细胞信息传递、细胞识别、细胞免疫、细胞分化以及