04.第四章核酸结构的功能(3–5节打印).pptVIP

04.第四章核酸结构的功能(3–5节打印).ppt

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04.第四章核酸结构的功能(3–5节打印)

请同学们做好上课的准备 复习一下上节课的内容 过会儿我会提问的 计入平时成绩的哦? 问题 什么是核酸? 哪里有核酸? 核酸与检验技术(检验医学)的关系? 吃核酸能补基因吗? 二、核酸的发现和研究工作进展 1868年 Fridrich Miescher从脓细胞中提取“核素” 1944年 Avery等人证实DNA是遗传物质 1953年 Watson和Crick发现DNA的双螺旋结构 1968年 Nirenberg发现遗传密码 1975年 Temin和Baltimore发现逆转录酶 1981年 Gilbert和Sanger建立DNA 测序方法 1985年 Mullis发明PCR 技术 1990年 美国启动人类基因组计划(HGP) 1994年 中国人类基因组计划启动 2001年 美、英、中等国完成人类基因组计划基本框架 2003年 人类基因组计划完成—— 约3~4万个基因 这个要记住 DNA: A、T、G、C RNA: A、U、G、C 二、DNA的空间结构与功能 (三) DNA的功能 第一、二节小结 什么是核酸 核酸大事记:1953年,1985年 核酸的分类及分布 元素组成 核酸的基本单位 核苷酸的分子组成:三个部分 碱基:DNA、RNA 核酸的一级结构、二级结构、三级结构 DNA的功能 第五节 核酸与检验技术 PCR Polimerase Chain Reaction 聚合酶链(式)反应 作用:扩增目标基因(DNA或RNA) 应用:甲流检测、艾滋病病毒检测等 核酸分子杂交 应用:研究染色体中某一种基因的位置、基因芯片 第三四五节 小结 RNA的主要三个分类 mRNA的功能 中心法则 DNA的最大紫外吸收峰在多少nm处?蛋白质呢? DNA变性的本质是什么? 核酸与检验技术 习题 名词解释: 核酸的一级结构、核酸的二级结构、核酸的三级结构、中心法则 DNA变性的本质是什么? 五、核酶 (一)具有催化功能的核酸称为核酶。 底物部分 (二) 核酶的锤头状结构 通常为60个核苷酸组成,包括有催化部分和底物部分组成锤头结构。 (三)核酶研究的意义 核酶的发现,对中心法则作了重要补充;是对传统酶学的挑战;利用核酶的结构设计合成人工核酶 。 了解即可 核酸是含磷酸和碱基的两性电解质,通常表现为较强的酸性。可用电泳和离子交换分离纯化核酸。 在碱性条件下,RNA不稳定,可在室温下水解。利用这个性质可以测定RNA的碱基组成,也可清除DNA溶液中混杂的RNA。 核酸是线性的大分子,其在溶液中的粘度很高。RNA分子比DNA短,在溶液中的粘度低于DNA。 第四节 核酸的理化性质 (The Physical and Chemical Characters of Nucleic Acid) 一、核酸的一般性质 二、紫外吸收 (一) 由于嘌呤和嘧啶中含有共轭双键,核酸在260nm处有最大吸收峰。(蛋白质在多少nm处有最大峰?) 碱基的紫外光谱 240 250 260 270 280 波长(nm) 2000 4000 6000 8000 10000 12000 14000 分子消光系数 AMP GMP UMP CMP dTMP 1. DNA或RNA的定量 OD260=1.0相当于: 50μg/ml双链DNA 40μg/ml单链DNA(或RNA) 20μg/ml寡核苷酸 2.判断核酸样品的纯度 DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8 RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0 (二) OD260的应用 了解即可 三、DNA的变性与复性 (一)变性 (denaturation) 1.定义 在某些理化因素作用下,DNA双链解开成两条单链的过程。本质是什么? 3.变性后其他理化性质变化 ① OD260增高 ② 浮力密度升高 ③ 粘度下降 ④ 酸碱滴定曲线改变 ⑤ 比旋度下降 ⑥ 生物活性丧失 (1)理化性质变化 2.因素 强酸,强碱,高温,高压,变性试剂如尿素以及某些有机溶剂如乙醇等。 本质是双链间氢键的断裂。 2、3了解即可 (2)增色效应: DNA变性时其溶液OD260增高的现象。 DNA的紫外吸收光谱 200 250 260 300 1.5 1.0 0.5 波长(nm) 吸光度值 变性状态 天然

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