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- 2017-05-14 发布于天津
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傻瓜反应体系实验方法据下表将适当浓度的模板和反向引物混合在处理过的管中模板和引物在反应体系中的浓度反应体系反应体系模板总引物引物处理水补足到通过振荡将冻干物完全溶解然后轻微离心加少许矿物油若使用带加热盖的仪可省略此步骤根据下列推荐的条件进行合成分钟合成分钟反转录酶失活根据反应条件进行反应退火温度及时间需要针对不同的引物模板组合加以优化常见问题及参考意见结构特点及的作用是由种未脱氧的核苷酸的单链构成的聚合物对分子的理化性能有重要影响对的降解作用通过进行不再需要必须的工作金属离子的参与便可完成分子在
傻瓜RT-PCR反应体系（Easy-Go? RT-PCR PreMix）
实验方法
据下表将适当浓度的模板RNA和反向引物混合在DEPC处理过的管中。
模板RNA和引物在反应体系中的浓度
反应体系 20μl反应体系 模板RNA 总RNA 0.5-1.0μg Poly(A)RNA 0.05-0.1μg 引物 引物 10-30pmol 2. DEPC处理水补足到20ul。
3. 通过振荡将冻干物完全溶解，然后轻微离心。
4. 加少许矿物油（若使用带加热盖的PCR仪，可省略此步骤）。
5. 根据下列推荐的条件进行cDNA合成。
42℃，60分钟（cDNA合成）
94℃，5分钟（反
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