分子生物学癌基因与抑癌基因2案例.ppt

第 二 十 章 癌基因、抑癌基因 与生长因子 Oncogenes, Anti-oncogenes and Growth Factors ① 控制细胞增殖的原癌基因活化或肿瘤抑制基因失活； ② 促细胞凋亡的基因失活或抑制凋亡的基因（抑癌基因）功能增强； ③ DNA修复基因失活，使突变在细胞内积累，并且累及到调节细胞增殖及细胞凋亡的基因。 这些基因中某一基因的单一突变所致肿瘤发生的几 率较小，数种相关基因突变的积累最终将导致肿瘤发 生、发展与转移。???????? 癌 基 因Oncogenes 一、细胞癌基因 细胞癌基因(cellular-oncogene，c-onc) 存在于生物正常细胞基因组中的癌基因（c-onc ），在正常情况下处于静止或低水平表达状态，其表达产物参与调节正常细胞的生长与分化。由于细胞癌基因在正常细胞中以非激活的形式存在，不致癌，故又称原癌基因 (proto-oncogenes，pro-onc) 。 广泛存在于生物界中； 基因序列高度保守； 作用通过其产物蛋白质来体现； 表达产物对正常细胞无害，而且对细胞正常生长、繁殖、发育和分化起精确调控。 在某些因素作用下被激活（基因结构或表达水平异常）后形成癌性的细胞转化基因。 第 二 节抑 癌 基 因Anti-oncogenes 杂合细胞的致癌性研究 将小鼠的恶性肿瘤细胞与正常细胞杂交融合，得到杂合细胞，失去恶性表型； 将杂交细胞接种在动物体内，不产生肿瘤； 导入正常细胞染色体的肿瘤细胞接种动物，通常不产生肿瘤 提示正常细胞中有抑制肿瘤的基因，即肿瘤抵制基因！ 二次打击学说 家族性Rb患者的肿瘤常在婴幼儿早发，且双侧多发性（散发患者刚发病较晚，且单发），遗传性和散发性的肿瘤都与RB基因的失活有关。 早发性患者从父母获得的一对等位RB基因，一个是正常（野生型）基因，另一个是的，如野生型RB基因再发生突变失活，其功能就会全部丧失，导致早期发生Bb. 散发性患者从父母获得的一对等位RB基因都是正常的，只有它们各自都突变失活，才可能使RB基因的功能丧失，肿瘤发生较晚。 据此提出“二次打击学说，即肿瘤的发生需要该基因位点发生两次突变” 抑癌基因编码产物的功能主要有诱导细胞分化、维持基因稳定、触发或诱导细胞凋亡等。总体上抑癌基因对生长起负调控作用，能抑制细胞的恶性生长。目前已鉴定的一些抑癌基因产物及功能如下： 人类体细胞属于二倍体细胞，其基因组的大多数区域是杂合的，即这些区域往往含有两个不同的等位基因（父母各一个）。 某些情况下，会丢失等位基因的一个拷贝，从而丧失其杂合性，该现象称杂合性缺失（loss of heterozygosity, LOH）。 LOH是肿瘤细胞中常见的异常遗传现象，发生杂合缺失的区域往往是抑癌基因所在的区域。如Rb 两个等位基因纯合性缺失不可能表达相应的蛋白质。 抑癌基因在细胞增殖、生长、分化过程中发挥重要作用，其功能缺失会导致肿瘤等相关疾病的发生。以TP53、 RB 、PTEN 三个肿瘤抑制基因为例说明： 磷酸化的Rb（pRb）蛋白是一种核磷蛋白，位于核内，为DNA结合蛋白，作为转录因子调节基因转录。 磷酸化和去磷酸化是调节Rb蛋白活性的重要形式，其磷酸化程序在细胞周期中发生周期性变化： G0、G1期: Rb蛋白去磷酸化/低磷酸化(为活性型，能促进细胞分化，抑制细胞增殖)；G2、S期、M期: Rb蛋白磷酸化。 调节Rb蛋白磷酸化状态重要的过程是发生在G1 /S期交界处。 磷酸化和去磷酸化是调节Rb蛋白活性的重要形式，其磷酸化程序在细胞周期中发生周期性变化： Rb磷酸化的程度，受细胞周期中增殖调控蛋白（细胞周期蛋白,cyclin、细胞周期蛋白依赖性激酶cyclin-dependent kinase, CDK )的直接控制。 G0、G1期: Rb蛋白去磷酸化/低磷酸化(为活性型，能促进细胞分化，抑制细胞增殖)；G2、S期、M期: Rb蛋白磷酸化。 调节Rb蛋白磷酸化状态重要的过程是发生在G1 /S期交界处。 细胞进入G1期时Rb蛋白处于低磷酸化状态，使细胞不能通过G1 – S期关卡。 低磷酸化Rb蛋白对G1 期– S期的负调节作用，是通过与转录因子E2 F结合而实现的。 在细胞增殖信号通过依赖于cyclinD1的激酶CDK4的活化，导致Rb磷酸化，高磷酸化的Rb不能与E2 F 结合， E2 F 启动基因转录，促进细胞G1 – S 转化。 p53基因是人类恶性肿瘤中最常涉及到的抑癌基因，还发现其功能与细胞周期的控制有密切关系。 第 三 节生 长 因 子Growth factors p53的结构及其在清除DNA损伤细胞中的