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第 卷 第 期 中 国 食 品 学 报 14 9 Vol． 14 No． 9 年 月 2 0 1 4 9 Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology Sep． 2 0 1 4 1 种快速高效提取乳酸菌质粒的方法 ， ， ， ， ， 1 2 1 2 1 2 1 2 3 1 2* 3 张 波 李 晨 董 慧 寇田田 许文涛 田洪涛 罗云波 （1 河北农业大学食品科技学院 河北保定 071001 2 河北省农产品加工工程技术研究中心 河北保定 071001 3 中国农业大学食品科学与营养工程学院 北京 100083） 摘要 根据碱裂解提取大肠杆菌质粒的原理与程序，借鉴 和 ’ 的乳酸菌质粒提取方法，使酶 Anderson O Sullivan 解破壁和碱破膜变性相结合，通过优化乳酸菌质粒提取中酶浓度、酶解时间、质粒沉淀条件，提出 种高效提取 1 乳酸菌质粒的方法。 在此基础上，分析并检验该方法提取乳酸菌质粒的适用性、效率和质粒质量。 结果表明：采 用该方法可提取乳球菌及乳杆菌中的质粒，所提取的乳酸菌质粒不受质粒大小及拷贝数高低的影响，乳酸菌质 粒的检出率和提取的成功率显著提高；提取的乳酸菌质粒达到 DNA 纯化后的水平，可用于酶切等分子生物学 操作。 操作实践表明：该方法适合乳酸菌质粒的小量提取（1.5～2 mL 菌液）到中量提取（10 mL 菌液）；其操作周 期与大肠杆菌质粒提取检测彼此相当，而比 和 ’ 提取检测乳酸菌质粒缩短 。 本文还就 Anderson O Sullivan 3～4 h 乳酸菌质粒提取中的主要原理及注意事项进行探讨， 以期为进一步开发乳酸菌质粒分离纯化试剂盒提供理论 依据。 关键词 乳酸菌； 质粒提取； 简单快速； 稳定高效； 方法 文章编号 （ ） 1009-7848 2014 09-0007-07 [4] 乳酸菌（ ， ）促进人和 取过程中易断裂 ，这些都给乳酸菌质粒提取带来 LAB Lactic Acid Bacteria 动植物体健康的功能性已被世人公认，在食品、医 很大困难。 [1] [5] 药和