法医系进修班讲稿.pptVIP

DNA鉴定 提 纲： 犯罪人群DNA数据库； 大型灾难遇难者个体识别；。 参与泰国海啸救援； 华大方瑞司法物证鉴定中心的成长。 犯罪人群DNA数据库的意义 可以在短时间内为警方明确犯罪嫌疑人身份，提供侦查方向，提高破案效率。 可以对犯罪分子起到震慑作用，特别是数据库中已存有其相关资料。 可以有效地打击跨国或跨地区的犯罪活动。 可以促进相关实验室及其检测技术的标准化，有利于各实验室之间检测结果的对比和数据库资源的共享。 基本情况： 样本来源：青海省公安厅与青海省司法厅提供的青海省犯罪人员或嫌疑人的血样； 样品总量：14009份。 要求：完成所有原始信息的录入，完成所有样本的STR分型，并将结果汇总。 主要试剂和耗材： DNA提取：5％Chelex，水浴锅，离心机。 PCR扩增：AmpF?STR? Identifiler试剂盒， GeneAmp? PCR System 9700 上机： Liz500，POP－4 TM Polymer和POP－7 TM Polymer。3730XL，3130XL测序仪。 全程：条码，条码打印机。 数据处理： 数据分析：GeneMapper 软件； 数据控制，分析录入和比对。 LIMS系统； 数据分析录入软件； 数据比对软件。 检测流程 分取检材； DNA提取； 转板； PCR扩增； PCR产物变性； 上机电泳，数据收集； 数据整理、分析和录入。 样本原始状况与标记后对比 提取检材——录入系统 PCR扩增前，转板 转板——将384板条码扫描进入系统 转板——扫描样品到384板 PCR扩增——进入PCR扩增系统 PCR扩增——实验条件确认 PCR产物变性——信息录入 变性——上机前变性条件确认 上机——生成3730或3130上机文件 上机——384孔板信息编辑 数据分析——GeneMapper软件数据处理 数据分析——导入数据录入分析软件 数据信息输入输出整体流程 数据分析——数据录入分析软件的界面 结果分析和讨论1 一轮实验共获得“有效”数据12625个；成功率为90.12％； 其中用于进行质量控制的数据927份，占总检测量的7.34％。 样本采集发现编号重复的有65个，并且还存在字迹不清、信息内容缺失等问题； 数据库项目，如果接收到的样品只有编号信息，那么该编号成为标记样品的唯一性代码，至关重要，不能出现任何问题。 结果分析和讨论2 数据的质量控制 LIMS全程监控，条码唯一，数据唯一，每 步进行条码对照； 设置对照，耗材消毒，试剂盒检验； 每天随机抽取当天处理样本量的5％-10％， 由单独的质控人员按系统流程进行检测。 实践证明以上的系统设定是可行的，直至数据库结束，未检查出一例错误。 结果分析和讨论3 Identifiler试剂盒中的15个常染色体位点，除D8S1179外，其他的14个位点均出现一定数量的OL峰，但D21S11和D7S820这两个位点出现OL的几率最大，分别为0.63％和0.46％。 其中FGA位点出现了BIN外的检测峰，即检测峰位于D5S818和FGA之间，片段长度集中在200-205bp之间。 由于D21S11,D7S820两个位点出现OL的几率较大，经过进一步实验验证，建议可以考虑在bin中加入适合于中国人群的数值。 结果分析和讨论4 结果分析和讨论4 本项目的血样中，共涉及28个民族；其中血样超过50份的民族有：汉族8646份，回族2975份，藏族968份，芷族317份，土族172份，蒙古族146份，撒拉族108份，东乡族99份；不同位点检测出的等位基因数目不同； 汉族最多检出的等位基因有23个，最少检出的等位基因只有9个； 对八个民族的数据通过数据录入软件筛选后，进行等位基因频率，多态性信息含量等计算。 结果分析和讨论5 结果分析和讨论5 TPOX,TH01两个位点的杂合度、多态信息含量等指标过低，表明这两个位点的多态性不高，不适合中国人群使用，可以考虑用其他位点替代。同时，蒙古族相对其他民族比较特殊，所以针对不同的民族也存在较大的差异。 系统软件讨论——LIMS系统 实验室管理系统（LIMS系统） 实验流程的监控； 实验数据的统计； 实验信息的检索。 系统软件讨论——分析软件 系统软件讨论——分析软件 系统软件讨论——比对软件 系统软件讨论——比对软件 大型灾难遇难者个体识别 建立一套有效的体系，能够对遇难者生前（ante-mortem AM）和死后（post-mortem PM）数据的精确匹配而达到识别的目的。 总体准备 建立灾难遇难者个体识别委员会； 各种相关文件的准备