发酵工艺综合实验教材.ppt

（1）熟悉实验室固体发酵技术 （2）观察并记录黑曲霉培养过程中菌种生长变化情况 （3）掌握xyLanase酶活力的测定方法 一、实验目的 在畜禽和水产动物肠道内形成较高的粘度的食糜，不易被动物消化。 同时肠道粘度增加导致营养物质在肠道内蓄积，形成富含养分的食糜，使得微生物增殖，损害肠道黏膜正常形态与功能，还可导致腹泻和死亡率的增加。 导致动物采食量下降，妨碍消化液与底物的混合，从而阻止脂肪的消化吸收 二、实验原理 1.实验菌种：黑曲霉（Aspergillus niger） 2.实验仪器及设备 ①玻璃试管、试管架、吸管（1mL，2mL，10mL）、吸耳球、离心管、容量瓶、烧杯、三角瓶（250 mL）、电子分析天平、移液枪、玻璃棒、试纸、塑料漏斗、电炉等。 ②自动灭菌锅、无菌间、超净工作台。 ③振荡培养箱、分光光度计， 三、实验材料 3.试剂配制 ①1%（W/V）木聚糖底物 ：称取1.00g木聚糖加入80mL预热至80℃的蒸馏水中，再加热至沸点，冷却后定容至100mL，4℃保存备用。 （每小组！） ②10mg/mL木糖母液 ：准确称取1.0000g分析纯木糖，用适量蒸馏水溶解，定容到100mL， 4℃保存备用，用时稀释10倍。（每小组！） 发酵工程实验 发酵工程实验 发酵工程实验 发酵工程实验 发酵工程实验 发酵工程实验 生命科学技术系 发酵工程综合实验 发酵工程教研室 2012.05 实验内容 发酵工程实验Ⅰ ------酵母的液体发酵 发酵工程实验Ⅱ ------黑曲霉的固体发酵 内容 本次实验分酵母的液体发酵和黑曲霉固体发酵两个内容；以实验小组为单位，分发、清洗本小组实验所需要玻璃仪器、结束后清洗回收；配制本小组所需基本试剂。 准备 每班选出1-2个同学跟着实验室毛会丽老师准备实验，配制试剂，活化菌种，准备时间段在第十五周。选出人员后报与毛会丽老师。 分组 每个实验室由班长总负责，分为2大组； 每一大组分2小组，自由组合分别作液体、固体发酵实验；分组名单由班长报给辅导老师，向辅导老师留联系方式。 发酵工程实验Ⅰ ------液体发酵 实验目的 实验材料和器材 实验内容 作业及思考题 实验一 酵母的液体摇瓶发酵实验 掌握液体发酵种子液的制备和摇瓶发酵技术及方法 掌握总糖和还原糖含量的测定方法 掌握常用的比色分析方法的操作技术 熟悉酵母菌的微生物学特性及培养方法 一、实验目的 二、实验材料和试剂配制方法 1.实验菌种：酵母菌 菌丝显微照片 平板照片 2.实验仪器：玻璃试管、试管架、吸管（1mL，2mL，10mL）、吸耳球、容量瓶、烧杯、三角瓶（250 mL，500mL）、量筒（250mL，500mL，1000mL）、玻璃棒、试纸、塑料漏斗、电炉、接种铲（针）、振荡培养箱、恒温箱、台秤等。 3.培养基 (1)斜面培养基 麦芽汁培养基：10o麦芽汁100mL，琼脂2g(2%)， 加热煮沸溶解，蒸发所失体积用水补足，定容至100mL。 PDA培养基：取去皮马铃薯20g，切成小块，加水100mL。微沸30min，用纱布过滤，加2g葡萄糖，加热煮沸后加入2g琼脂，继续加热融化并补足失水，定容至100mL。 (2)种子培养基：10°麦芽汁，pH5.0或葡萄糖10%，玉米浆1%，尿素0.2%，pH5.0。 (3)发酵培养基：玉米粉经液化、糖化，折合葡萄糖浓度为10%，玉米浆1%，硫酸铵0.4%，pH5.5。 装量：30mL/250mL 4.试剂的配制 (1) 1mg/mL葡萄糖标准液：准确称取100mg分析纯葡萄糖，置于小烧杯中用少量的蒸馏水溶解后，定容转移到100mL的容量瓶中，以蒸馏水定容至刻度，摇匀，冰箱保存备用。（每小组！） ⑵ DNS试剂：称取20.00g 3,5-二硝基水杨酸溶解于1.5L水，一边不断地搅拌一边逐渐加入32.0gNaOH，让其溶解。然后逐渐加入苯酚10g，亚硫酸钠10g，酒石酸钾钠600g，加热至45℃，冷却后在2.0L的容量瓶中定容。室温存放在棕色瓶中。（已经配制！） (3) 酚酞指示剂：称取5g酚酞，溶于250mL 70%乙醇中。 (4)6moL/L HCL: 先于1000mL容量瓶中加入约200mL蒸馏水，然后取540mL浓盐酸沿瓶壁缓慢加入，加水定容至1000mL。 (5)6moL/L NaOH ：称取240g NaOH ，溶于800mL 蒸馏水中，待散热冷却后，加水定容至1000mL。 （每个实验室！） 三、实验内容 摇瓶酵母的接种与培养 总糖含量的测定 还原糖含量的测定 pH值的测定 无菌条件下，从冷藏的产生菌的斜面孢子中，刮取适量孢子涂在PDA斜面上，然后置28-30℃的恒温箱培养2-3d。 斜面菌种的制备 内容1摇瓶酵母的接种与培养