猪博卡病毒PCR检测方法的建立及初步应用.pdfVIP

第 38 卷第9 期 中国预防兽医学报 Vo l. 38 ,No.9 2016 年 9 月 Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine Sep. 2016 doi: 10.3969/j .issn.1008-0425.2016.09.09 猪博卡病毒 PCR 检测方法的建立及初步应用 周 宇 1 ，李春萍 2 ，朱事康2 ，宋斯伟 3 ，徐鹏飞陈燕忠2 ，采维民 1* (1.吉林农业大学，吉林长春 130118; 2. 惠州出入境检验检疫局，广东惠州 516001; 3. 吉林大学动物医学学院，吉林长春 130062; 4. 辽宁医学院，辽宁锦州 121001) 摘 要:为建立能够检测猪博卡病毒(PBoV)所有基因型的检测方法，本研究根据 PBoV 每个基因群(Gl 、 G2 和G3)的保守区域设计特异性引物，建立了检测 PBoV 的 PCR 方法。特异性试验结采显示除PBoV 外，其它猪病 病原核酸扩增均主阴性，具有较强的特异性;对内在D-GD6、 pMD-GDI8 和 pMD-GD4 的最低检测限分别为 4.64x 3 3 3 拷贝 拷贝 拷贝 /μ 10 /μL 5.29x10 /μL 1.1 6xl0 L，敏感性较高;采用该方法对 39 头份猪的肝脏、肺脏、脾 和 、 脏和小肠内容物进行检测，阳性率为 74.4 % (29/39)。其中G1群 PBoV 的检出率最高， G2 群检出率最低; Gl 群 G3 群在 4 种样品中均有检出， G2 群只在小肠内容物中有检出;同时本研究首次在肝脏中检出该病毒。本研 和 究结果表明， PBoV 感染情况复杂，存在多基因型的混合感染。本研究为进一步对病毒进行基因分型和致病性研 究提供检测依据。 关键词:猪博卡病毒; PCR; 检测;感染 中圈分类号: S852.65 文献标识码:A 文章编号: 1008-0589(2016)09-0715-04 Development and preliminary application of the PCR assay for detection of porcine bocavirus 1 ZHOU Yu I, LI Chun-ping2. ZHU Shi-kang2. SONG Si-weP , XU Peng\ CHEN Yan-zhong2, LUAN Wei-min * (1. Ji1in Agricultura1 University , Changchun 130118, China; 2. Huizhou Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau of P.R.C , Hui约ou 516001 , Cbina; 3. Ji1in University College ofVeterinary Medic