猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法建立及初步应用研究.pdfVIP

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2017-05-17 发布于北京
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猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法建立及初步应用研究.pdf

中面，tt孝通d且 2012 ,28(26):59-62 Chinese Agricultural Science Bulletin 猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法建立及初步应用研究吴学敏l ，2 ，陈如敬1气王隆柏飞车勇良11 ，刘玉涛11 ，庄向生 l 气严山11 ，周伦江1.2 (福建省农业科学院畜牧兽医研究所，福州 350013;福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心，福州I 350013) 摘要:为建立一种特异、敏感的PEDV的检测方法。根据GenBank 中公布的猪流行性腹泻病毒CV777 株的M基因序列，设计了一对特异性引物，扩增长度为 680 坤的片段。将PCR产物进行测序，与 CV777 株、SH5株M基因的同源性分别为99.2%和97.6%。试验表明:该方法具有较好的特异性和敏感性，并能检测到PEDV 的 RNA浓度下限为 100 pglμL。从福建省的3 个地区共采集58 份哺乳仔猪腹泻样品，并应用此方法进行检测，其阳性检出率为 87.9%。关键词:猪流行性腹泻病毒;RT-PCR;M基因中图分类号:S855.3 文献标志码:A 论文编号:2012-2205 Development and Preliminary Application of a RT-PCR for Detection of Porcine Epidemic Diarrhea Virus l 2 1 l l Wu Xuemin • , Chen Rujing 气顶rang Longbai 1.2, Che Yongliang 气 Liu Yutao 气 1 2 Zhuang Xiangsheng 2, Yan Shan飞Zhou Lunji l. • ang (lnstitute 0/Animal Husbαndry and Veterinary Medicine , F.叼ian Academy 0/Agriculture Sciences , Fuzhou 350013; F.uiian Animal Diseαse Control Technology Development Center, Fuzhou 350013) Abstract: In order to establish specific and sensitive detection methods of porcine epidemic diarrhea virus (PEDV). A pair of primer was designed to amplify a product about 680 bp , according to the sequence of the M gene sequence of PEDV -CV777 strain of PEDV in Genbank. The amplified product was sequ