斐林试剂热滴定定糖法概念.docVIP

费林试剂热滴定定糖法 xx 生科四班 201100140120 同组者：xx 【实验目的】 1. 初步掌握费林试剂热滴定定糖法的原理和方法。 2. 正确掌握滴定管的使用方法和热滴定的终点。 【实验原理】 1. 还原糖 还原糖（reducing sugar ）：羰基碳（异头碳）没有参与形成糖苷键 能够还原斐林(H.von Fehling)试剂或托伦斯(B.Tollens)试剂(银氨溶液)的糖称为还原糖，所有的单糖（除二羟丙酮和五碳糖，即核糖和脱氧核糖），不论醛糖、酮糖都是还原糖。大部分双糖也是还原糖，蔗糖例外。斐林试剂是含 Cu2+络合物的溶液，被还原后得到砖红色 Cu2O的沉淀。托伦斯试剂被还原后（银镜反应）能生成单质银，在试管壁上可看到“银镜”。分子结构中含有还原性基团（如游离醛基`半缩醛羟基或游离羰基）的糖，叫还原糖，如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖。 一般情况下，单糖的还原能力主要来自它的醛基，如葡萄糖，而多糖则大多因为半缩醛羟基的存在。还原后，自己会变成糖酸。如葡萄糖就会变成葡萄糖酸。 2. 费林试剂 费林试剂由氢氧化钠的质量分数为 0.1 g/mL 的溶液和硫酸铜的质量分数为 0.05 g/mL 的溶液，还有酒石酸钾钠配制而成的。它与可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下，能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀。因此，斐林试剂常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在与否。 3. 实验方法 本实验采用费林试剂热滴定法，费林试剂是氧化剂，由甲、乙两种溶液组成。甲液含硫酸铜和次甲基蓝(氧化还原指示剂)；乙液含氢氧化钠，酒石酸钾钠和亚铁氰化钾。当甲、乙两溶液混合时，硫酸铜与氢氧化钠反应生成天蓝色的氢氧化铜沉淀。在碱性溶液中，酒石酸钾钠与沉淀的氢氧化铜作用形成可溶性的络合物。 【实验仪器】 1. 移液管(5、10 毫升) 2. 100 毫升容量瓶 3. 水浴锅 4. 铁架台 5. 胶头滴管 【实验材料】 1.面粉 2. 酚酞试剂 3. 菲林试剂（甲、乙液） 4. 10%氢氧化钠 5. 标准葡萄糖（1mg/ml） 6. 6M HCl 7. 烧杯 8. 玻璃棒 9. 碱式滴定管 10. 电炉 11. 分析天平 【实验操作】 1. 总糖的提取 准确称取面粉 1 克，加入 6mol/L 盐酸 10 毫升，蒸馏水 15 毫升，混匀。沸水浴加热半小时后，取出几滴水解液用碘化钾-碘溶液检查水解是否完全，若已经水解完全，则不呈现蓝色。冷却后用 10%氢氧化钠中和至中性溶液，定容至 100 毫升。准确吸取该溶液 10ml，移入 100ml容量瓶内并定容至刻度，即为测定总糖的样品液。 2. 空白测定 准确吸取费林甲、乙液各 5ml 和蒸馏水 5ml 放入 100 毫升的锥形瓶中，再用滴定管加入6ml 的标准葡萄糖液，混匀后加热，沸腾后，记录下滴定管的起始刻度，每滴 1-2 秒的速度由滴定管滴入标准葡萄糖液直至蓝色变成黄色且在 30s 内颜色又变成深红色为止。记录滴定完后滴定管的刻度，并同时记录滴定所需时间。平行测定三次，直至所得的平均数与各组的差值＜0.05ml。 3. 总糖的测定 准确吸取样品液 5ml 放于 100ml 锥形瓶内，加入费林甲液、乙液各 5ml，为使测定的时间与空白测定的时间基本一致，向锥形瓶内加入 3ml 的标准葡萄糖液，然后按测定空白同样操作进行滴定（控制流速，使滴定时间与空白滴定的时间基本一致），记下耗用标准葡萄糖的毫升数。平行测定三次，直至所得的平均数与各组的差值＜0.05ml。 2、3 步中所加试剂如下表： 空白滴定 样品滴定 次数 1 2 3 平均 1 2 3 平均 费林甲/ml 5 5 5 / 5 5 5 / 费林乙/ml 5 5 5 / 5 5 5 / 蒸馏水/ml 5 5 5 / / / / / 样液/ml / / / / 5 5 5 / 预加葡萄糖/ml 8 8 8 / 4 4 4 / 消耗葡萄糖/ml 1.75 1.50 1.45 1.57 1.25 1.30 1.15 1.23 【计算】 样品m=1.0025g V1=9.57 V2=5.23 还原糖(或总糖)%= =86.58% 【分析讨论】 1. 原理分析 本实验采用费林试剂热滴定法，费林试剂由甲、乙两种溶液组成。甲液含硫酸铜和次甲基 蓝(氧化还原指示剂)；乙液含氢氧化钠，酒石酸钾钠和亚铁氰化钾。当甲、乙两溶液混合时， 硫酸铜与氢氧化钠反应生成天蓝色的氢氧化铜沉淀。在碱性溶液中，酒石酸钾钠与沉淀的氢氧 化铜作用形成可溶性的络合物。热滴定中滴入标准葡萄糖液直至蓝色变成黄色且在 30s 内颜色 又