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- 2017-05-19 发布于北京
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09级工技一班 吕满枝 吴伟岸 张日兴 四、实验材料及试剂 大蒜细胞SOD酶液,紫苏籽, 正己烷,蒸馏瓶,试管, 碳酸缓冲液0.05mol/L, EDTA溶液0.1mol/L,蒸馏水, 肾上腺素液0.5mol/L, 离心机,分光光度计 五、实验操作步骤 5.1紫苏油的提取 用搅拌机将50 g苏籽研成末状,放入蒸馏 瓶中,加入正己烷100mL,于55℃恒温,回流1h,过滤、蒸馏可以得到深黄色油状液。 5.2 大蒜细胞SOD的提取 5.2.1 SOD的提取 取30g左右的大蒜蒜瓣,用搅拌机打碎并加入2倍~3倍的0.05mol/l pH7.8 的磷酸缓冲液,搅拌10min,使SOD充分溶解到缓冲液中,然后3000r/min离心15min,弃沉淀,得提取液。 5.2.2 除杂蛋白 提取液加入0.25倍体积的氯仿-乙醇混合溶剂搅拌15min,3000r/min 离心15min,去杂蛋白沉淀,得粗酶液。 5.2.3 SOD的沉淀分离 将上述酶液加入等体积的冷丙酮,搅拌15min,3000r/min 离心15min,得SOD沉淀。将SOD沉淀溶于0.05mol/L pH7.8 的磷酸缓冲液中,得到SOD酶液。 5.3 紫苏油对大蒜SOD活性研究 取5根小试管,分别加入0.1、0.2、0.3、0.4、 0.
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