GDNF基因修饰神经干细胞移植治疗大鼠帕金森病.PDFVIP

·32 · doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2016.01.06 J South Med Univ, 2016, 36(1): 32-38 基础研究 GDNFGDNF 基因修饰神经干细胞移植治疗大鼠帕金森病基因修饰神经干细胞移植治疗大鼠帕金森病 段奎甲，王向鹏，杨智勇，王 波，王明国，张海龙，邓兴力 昆明医科大学第一附属医院神经外科，云南 昆明 650032 摘要：目的探讨孕14~ 15 d 胎鼠中脑来源神经干细胞（mNSCs）被胶质源性神经营养因子（GDNF）基因修饰并移植于帕金森病 模型大鼠纹状体区的治疗作用。方法 取孕14~ 15 d 胎鼠解剖显微镜下分离中脑腹侧组织进行mNSCs 培养，培养5 d 后行GFP/ GDNF 基因修饰。PD 大鼠模型的建立参照大鼠脑立体定向图谱，立体定向中脑背盖腹侧区、内侧前脑束注射6-羟多巴胺。将 PD 大鼠随机分组，将基因修饰的干细胞以及无基因修饰干细胞移植到帕金森病大鼠纹状体区，建立空白mNSCs（PBS 替代）移 植组、GFP基因修饰mNSCs 移植组、GDNF基因修饰mNSCs 移植组3个实验组。移植细胞前后进行行为学评估，以腹腔注射阿 朴吗啡（APO 0.5 mg/kg）诱导PD 大鼠旋转圈数作为细胞移植的治疗作用评估手段。免疫荧光组织化学鉴定移植细胞存活、迁 移和分化。结果 GDNF基因修饰神经干细胞移植组较对照组和GFP基因修饰神经干细胞移植组有明显的行为改善；移植56 d 后，GDNF 基因修饰mNSCs 移植组较其他两组检测到更多细胞存活，向多巴胺能神经元分化较其他两组都有增加趋势。结论 GDNF基因修饰mNSCs 移植可显著改善PD 大鼠的运动障碍，其分子机制有待进一步研究。 关键词：中脑神经干细胞；胶质细胞源性神经营养因子；帕金森病；移植；大鼠 Therapeutic effect of GDNF gene-modified mesencephalic neural stem cell transplantation in a rat model of Parkinson disease DUAN Kuijia, WANG Xiangpeng, YANG Zhiyong, WANG Bo, WANG Mingguo, ZHANG Hailong, DENG Xingli Department of Neurosurgery, First Affiliated Hospital of Kunming Medical University, Kunming 650032, China Abstract: Objective To evaluate the therapeutic effect of transplantation of mesencephalic neural stem cells (mNSCs) genetically modified by glial cell line-derived neurotrophic factor (GDNF) gene in a rat model of Parkinson disease. Methods mNSCs isolated from the lateral component of the midbrain of fetal rats at gestational age of 14 or 15 days were cultured for 5 days before genetic modification with GFP or GDNF gene. Rat models of Parkinson disease established by stereotactic injection of 6-hydroxy dopamine in the ventral area of the midbrain and the medial forebrain bundle were randomized into 3 groups to receive PBS injection, GFP gene-modified mNSCs transplantation, or GDNF gene-modified mNSCs transplanta