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1.卵母细胞的采集和培养。
§3.2体外受精和早期胚胎培养 一、教学目标: 1.简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。 2.简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。 3.认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。 二、教学重点: 1.体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。 2.哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。 三、教学难点: 1. 卵母细胞的采集和培养。 2. 精子的采集和获能。 * 1978年7月25日世界首例试管婴儿 1988年3月10日我国首例试管婴儿 1992年我国首例三胞胎试管婴儿 根据资料回答下列问题: 1.资料上用到了什么生物技术? 试管婴儿技术(包括体外受精、胚胎体外培养)和胚胎移植技术。 2.试管婴儿和母亲正常怀孕,生产的过程有何异同? 相同之处:都通过有性生殖产生,在母体子宫内发育形成胎儿。 不同之处:受精作用在体外,并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。 试管动物技术: 通过 使卵子和精子在 下成熟和受精,并通过培养发育成 后,再经移植产生后代的技术。 体外条件 人工操作 早期胚胎 国产奶牛:年均产奶量3000公斤左右 国际良种奶牛:年均产奶量10000公斤左右 引进一头良种成年奶牛需要3万-5万元; 牛的生育率低,一头牛一胎只生一只,一生只能生育四五次。 牛的生育率虽然很低,但是牛的卵母细胞却相当的多,其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右; 公牛产生的精子数目就更多了。 一、从试管牛说起 试管动物技术过程: 第一步:体外受精 第二步:胚胎的早期培养 第三步:胚胎移植 胚胎移植 采集良种母牛的卵母细胞 卵母细胞的体外培养 采集良种公牛精子 精子体外获能 体外受精 良种牛体外受精胚胎 受体牛 良种犊牛 成熟期牛 屠宰加工厂 市场 采集卵巢中的卵母细胞 “试管牛”工厂化生产的技术流程图 1982年世界首例试管牛犊问世 实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是 和 的培养。 体外受精 早期胚胎 主要包括 、 和 等几个主要步骤 。 概念:采取雌性动物的 和雄性动物的 ,使其在 中受精。 二、体外受精 卵母细胞 精子 试管 卵母细胞的采集 精子的获取 受精 1.卵母细胞的采集和培养 对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。 实验动物如小鼠、兔,以及家畜猪、羊等卵细胞的采集: 最常用的方法是卵巢经过 处理,具体做法是给供体注射 ,使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子,之后从 中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。 超数排卵 促性腺激素 输卵管 大家畜或大型动物,如牛,卵细胞的采集: 从屠宰场已屠宰母畜的 中采集卵母细胞,也可以借助 、 或 等工具确定卵泡位置,直接从活体动物中吸取泡卵液(连同卵母细胞)取出,在体外进行人工培养,使其成熟。 卵巢 超声波(B超)探测仪 内窥镜 腹腔镜 牛卵巢 B超活采仪 B超引导法: 借助超声波探头和屏幕的引导,从活母畜卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有超声波探头和采卵针的采卵器通过阴道插入子宫,同时通过将卵巢贴在探头上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置,利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。 活体采集的牛卵母细胞 卵母细胞的成熟培养:CO2培养箱 培养箱 培养箱 2.精子的收集和获能 收集精子的方法有: 假阴道法 手握法 电刺激法 * * *
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