细菌通用引物在张家口地区奶牛乳房炎病原菌检测中的效用开题报告PPT.pptVIP

河北北方学院 毕业论文开题报告 题 目：研究张家口地区奶牛乳房炎病原菌检测中细菌通用引物的作用 姓 名： 谢佳 院 系： 动物科技学院 专 业： 动植物检疫学 年 级： 07级动植物检疫学本科班 学 号： 20071040115 指导教师： 张 丽 云 开题时间： 2010-12-17 河北北方学院教务处制 论文题目 研究张家口地区奶牛乳房炎病原菌检测中细菌通用引物的效用 课题来源 指导教师承担 研究方向 旨在通过对细菌通用引物在奶牛乳房炎病原菌检测中作用的研究来探寻一种简单、快捷的检测方法。 一、立题依据（研究的目的与意义） 随着我国人民生活水平的不断提高，人们对牛奶的消费量迅速增加，从而促进了奶牛业生产的迅速发展。目前，我国人均牛奶占有量为6kg,世界平均80kg，印度66kg，日本68kg，欧洲285kg，美国260kg，可见差距之大。牛奶作为一种非常理想的食品正逐渐被人们所接受，“一杯奶强壮一个民族”有其深刻的内涵，我国目前正在推行的学生奶工程具有非常深刻的意义。由此可见，我国的奶牛业生产前途光明。 饲养奶牛的目的就是要最大化地追求奶牛的高产、稳产、优质、安全和高效生产.通过对奶牛乳房炎的调查了解,可以认识奶牛的乳房炎对奶牛业的危害,并可指导奶牛的饲养管理技术及环境控制,使奶牛的生产效益最大地得到发挥. 奶牛产业是我省扶持发展的一项重点产业承德，唐山，沧州等地都有较大的养殖基地。通过近10年的发展，我省已经有较大的奶牛养殖基地和鲜奶生产基地。如何巩固和稳定奶牛产业，确保农民收入持续增加，成为我省亟待解决的问题。如何为消费者提供优质的奶产品是奶业工作者要完成的重要任务。奶牛乳房炎，特别是隐性乳房炎一直是困扰奶牛业经济效益及其迅速发展的主要原因之一。我国的奶牛隐性乳房炎头数阳性率为46．4％～85．7％，乳区阳性率为28．0％～59．0％。国外奶牛乳房炎发病率也很高，例如美国为30％～70％。高乳房炎发病率造成奶牛产奶量下降，牛奶质量下降，母牛过早淘汰等、给奶牛业造成巨大损失。鉴于乳房炎高发病率、低治愈率的特点，乳房炎的预防越来越受到人们的关注。世界范围内，每年的牛奶生产损失可达380万吨；在我国每年用于治疗奶牛乳房炎的费用近亿元人民币。 奶牛乳房炎是乳房受到物理、化学、微生物刺激所发生的一种炎性变化，其特点是奶中体细胞，特别是白细胞增多以及乳腺组织发生病理变化。奶牛乳房炎是世界奶牛业的主要危害因素之一，它不仅影响产奶量，造成经济损失，而且影响牛奶的品质，危害人类的健康。据我国北京、上海、广州、哈尔滨等城市调查，乳房炎是奶牛场最严重的疾病之一，发病率达40%以上，个别牛群发病率更高，造成的经济损失虽无确切数据，但也是惊人的。【1】 常规的检测方法是根据不同致病菌的生物学特性,采用不同的培养基和培养方法,检出可疑的致病菌,再用生化反应、血清学试验、噬菌体裂解试验等方法加以鉴定。但由于临床用药等原因,细菌培养常常阴性,并且传统的检测方法操作繁琐,费时费力。我们利用建立在16S rRNA基础上的通用引物,并结合PCR快速、灵敏的特点,可在3 h~4 h内扩增出奶样中致病菌的相应基因,为扩增产物的进一步鉴定及奶牛乳房炎的诊断、治疗奠定基础。为了建立PCR直接检测奶牛乳房炎致病菌的方法,探索通用引物在奶牛乳房炎致病菌检测中的应用价值。利用16S rRNA基因的高度保守性,设计并合成细菌的通用引物,采用合成的引物扩增标准菌株及患有奶牛乳房炎的奶样。查阅到有关实验研究表明【2】,通用引物扩增5-6种标准菌株,可得到清晰的电泳条带;通用引物PCR可检出标准菌株DNA;对患有奶牛乳房炎的奶样进行扩增,也可得到清晰的电泳条带。建立在16S rRNA【3】基础上的通用引物在奶牛乳房炎的检测，可为进一步判断细菌的种类奠定基础。 旨在通过对细菌通用引物在奶牛乳房炎病原菌检测中作用的研究来探寻一种简单、快捷的检测方法【4】。 二、研究内容(内容、结构框架或研究提纲以及要突破的难点)： （1）根据学过的关于乳房炎的知识以及文献资料确定各种试验菌种； （2）制备标准菌DNA以及样品DNA （3）利用建立在16S rRNA【5】基础上的通用引物, 并结合PCR快速、灵敏的特点,可在3 h~4 h内扩增出奶样中致病菌的相应基因,为扩增产物的进一步鉴定及奶牛乳房炎的诊断奠定基础 三、研究方法与技术路线 查阅文献拟定各种菌株制备标准菌DNA及样品DNA 通用引物扩增的广谱性试验