南开大学细胞生物学课件4.pptVIP

1、MPF的发现及其作用 Sunkara等将HeLa细胞同步于细胞周期的不同阶段，制备提取液，用显微注射法注入G2期蛙卵母细胞中，发现可促使G2期细胞进入分裂期。 只有M期细胞提取液具有促分裂活性，而间期细胞提取液却没有促分裂活性，提示M期细胞中可能存在一种促分裂因子。 1971年，Masui和Markert用非洲爪蟾做实验，明确提出MPF（maturation-promoting factor ）概念。 他们用雌性激素孕酮（progesterone）刺激处于meiosis I前期的非洲爪蟾卵母细胞，诱导其成熟（进行减数分裂）。然后将其细胞质注射于到另一个未成熟卵母细胞中，结果诱导后者成熟。再将后者细胞质注射到新的卵母细胞中，新的卵母细胞仍被诱导成熟。 他们认为，在成熟的卵细胞的细胞质中，必然有一种物质，可以诱导卵母细胞成熟。他们将此种物质称为促成熟因子，即MPF 。 用孕酮诱导卵母细胞成熟，卵母细胞需要进行蛋白质合成。而用成熟卵细胞的细胞质诱导卵母细胞成熟，则不需要蛋白质合成。这些结果表明，在成熟卵母细胞中，MPF已经存在，但无活性，称为前体MPF (preMPF)，通过翻译后修饰，可以转化为有活性的MPF。 1988年，Maller实验室从非洲爪蟾卵中分离出MPF，并证明其含有两种蛋白，二者结合后有蛋白激酶（kinase）活性。 Hunt等在海胆卵细胞