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农药生物测定实验指导 （自编试用1.0） 主 编：姜兴印 副主编：赵春青 张卫光 制药工程专业用 山东农业大学植物保护学院 2008年9月 棉铃虫人工饲料制备 一、实验目的 学习棉铃虫人工饲料制备技术和方法。本方法还适合玉米螟等人工饲料的制备。 二、实验用品和仪器设备 仪器设备：天平、高压灭菌器、罐头瓶、电饭锅、筛子（40目）、量筒、搪瓷盘、温度计 实验物品：小麦粉、玉米粉、黄豆粉、啤酒酵母粉、琼脂、棉叶、VC、棉油、苯甲酸钠、山梨酸钾、兽用链霉素、水等 三、实验方法 1. 配方： 用料 用量（g） 用料 用量（g） 小麦粉 300 琼脂 45 玉米粉 300 山梨酸钾 10 大豆粉 200 苯甲酸钠 5 棉叶（风干） 35 链霉素 200万单位 Vc 10 棉油 5ml 酵母粉 80 水 2000ml 2. 小麦粉、玉米粉、黄豆粉、酵母粉和棉叶装入罐头瓶中，高压灭菌40min.（120℃） 3. 水+琼脂煮开冷却至70℃，加入Vc、防腐剂、棉油混匀，再加入混合好的其他成分，充分混匀。 4. 倒入搪瓷盘，加盖冷却后放入冰箱中备用。 四、质量检查 饲料冷却后观察颜色和固化成型情况。 五、实验报告 农药生物测定药剂配制 一、实验目的 学习生物测定药剂配制的实验操作技术和方法。 二、实验用品和仪器设备 电子天平、计算器、烧杯、移液管、吸耳球、记号笔、容量瓶、量筒等。 实验原药：93%顺式氯氰菊酯，95%吡虫啉 实验制剂： 50%多菌灵WP，2.5%功夫EC(w/w)，33%施田补EC(w/v) 三、实验方法 1. 原药母液的配制与稀释 （1）用丙酮配制2％顺式氯氰菊酯母液50mL，然后稀释成200mg/L 50mL丙酮液。 （2）用丙酮配制1％吡虫啉母液50mL，然后稀释成125mg/L 50mL丙酮液（3）将顺式氯氰菊酯和吡虫啉按照5：2的比例混合，配制1.5%混剂50mL丙酮液。 2. 制剂的稀释 （1）50%多菌灵WP，稀释成200mg/L 100mL的水溶液（烧杯）。 （2）2.5%功夫EC，稀释成1000mg/L 100mL的水溶液（烧杯）。 （3）33%施田补EC，稀释成150mg/L 100mL的水溶液（烧杯）。 四、结果计算和处理 将以上每一种母液配制和稀释需要原药和制剂的量计算，并详细描述配制和稀释过程。 五、实验报告 撰写实验报告。 杀虫剂毒力测定－微量点滴法 一、实验目的 学习微量点滴法测定杀虫剂触杀毒力的实验操作技术和方法，学习和使用微量点滴仪。 二、实验用品和仪器设备 生化培养箱、电子天平、计算器、微量点滴仪、烧杯、移液管、养虫盒、镊子、滤纸、记号笔、容量瓶等。 实验药剂：顺式氯氰菊酯，2.5、5.0，10，20，40mg/L 实验材料：玉米螟5龄幼虫 三、实验方法 1. 药剂配制与稀释 用丙酮配制1％顺式氯氰菊酯母液，然后稀释成系列浓度。 2. 试虫选取与称重 选择个体大小一致的5龄幼虫，每个处理浓度3次重复，每个重复20头幼虫，电子天平称重求平均虫重。 3. 微量点滴仪的使用方法和注意事项 4. 药剂点滴 点滴部位：幼虫前胸背面，点滴量1.0uL左右，以溶剂处理为对照。 5. 点滴后的幼虫放置在养虫盒内，5头/盒，饲喂人工饲料，置于28℃的生化培养箱中。 四、结果检查和处理 处理48h后检查死亡数，用毛笔尖端或尖头镊子轻轻触动虫体，以不能正常爬行者为死亡。计算死亡率和校正死亡率，并求毒力回归方程和LD50 值。 五、实验报告 撰写实验报告，并对实验结果进行讨论分析。 杀虫剂毒力测定－浸渍法 一、实验目的 学习浸渍法（浸虫和浸叶法）测定杀虫剂触杀毒力和胃毒毒力的实验操作技术和方法。 二、实验用品和仪器设备 生化培养箱、电子天平、计算器、浸虫器、烧杯、移液管、养虫盒、镊子、滤纸、记号笔、容量瓶等。 实验药剂：80％氟虫腈WG 实验材料：小菜蛾3龄幼虫，甘蓝叶片 三、实验方法 1. 药剂配制与稀释 将药剂稀释1.0×105×，2.0×105×，4.0×105×，8.0×105×，以清水为对照。 2. 采用浸渍法先将甘蓝叶片在不同浓度的药液中处理3－5s，放在报纸上晾干，放在养虫盒里，每盒1片。 3. 用浸虫器将小菜蛾幼虫在药液中浸渍处理3－5s，每一浓度处理30头，分为3次重复，每一重复10头幼虫放在1个养虫盒内。 4. 28℃生化培养箱饲养。 四、结果检查和处理 处理3d后检查结果，用毛笔尖端或尖头镊子轻轻触动虫体，以不能正常爬行者为死亡。计算死亡率和校正死亡率，并求毒力回归方程和LC50 值。 五、实验报告 撰写实验报告，并对实验结果进行讨论分析。 杀虫剂触杀毒力测定-滤纸片药膜法 一、实验目的 学习滤纸片药膜的准备方法和利用