11-糖与糖生物化学1.ppt

糖的显色反应和定性鉴定 Molish反应—α-萘酚反应 糖在浓硫酸或浓盐酸的作用下脱水形成糠醛及其衍生物，与α-萘酚作用形成紫红色复合物，在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环，因此又称紫环反应。自由存在和结合存在的糖均呈阳性反应。此外，各种糠醛衍生物、葡萄糖醛酸以及丙酮、甲酸和乳酸均呈颜色近似的阳性反应。阴性反应证明没有糖类物质的存在，而阳性反应则说明有糖存在的可能性，需要进一步通过其他糖的定性试验才能确定有糖的存在。 所有的糖都呈Molish反应。 蒽酮反应 糖经浓酸作用后生成的糠醛及其衍生物与蒽酮（10-酮-9，10-二氢蒽）作用生成蓝绿色复合物。可用于定量测定样品中的总糖。 酮糖的Seliwanoff反应 是鉴定酮糖的特殊反应。酮糖在酸的作用下较醛糖更易生成羟甲基糠醛。后者与间苯二酚作用生成鲜红色复合物，反应仅需20-30秒。醛糖在浓度较高时或长时间煮沸，才产生微弱的阳性反应。 Sediwanoff试剂：0.5g 间苯二酚溶于1升盐酸（H2O∶HCl=2∶1）(V/V)中，临用前配制。 Fehling试验 费林试剂是含有硫酸铜和酒石酸钾钠的氢氧化钠溶液。硫酸铜与碱溶液混合加热，则生成黑色的氧化铜沉淀。若同时有还原糖存在，则产生黄色或砖红色的氧化亚铜沉淀。 为防止铜离子和碱反应生成氢氧化铜或碱性碳酸铜沉淀，Fehlin试剂中加入酒石酸钾钠，它与Cu2＋形成的酒石酸钾钠络合铜离子是可溶性的络离子，该反应是可逆的。平衡后溶液内保持一定浓度的氢氧化铜。费林试剂是一种弱的氧化剂，它不于酮和芳香醛发生反应。 Benedict试验 Benedict试剂是Fehling试剂的改良。Benedict试剂利用柠檬酸作为Cu2+的络合剂，其碱性较Fehling试剂弱，灵敏度高，干扰因素少。 Barfoed试验 在酸性溶液中，单糖和还原二糖的还原速度有明显差异。Barfoed试剂为弱酸性，单糖在Barfoed试剂的作用下能将Cu2+还原成砖红色的氧化亚铜，时间约为3分钟，而还原二糖则需20分钟左右。所以，该反应可用于区别单糖和还原二糖。当加热时间过长，非还原性二糖经水解后也能呈现阳性反应。 糖复合物中的单糖 主要有：D-葡萄糖、D-半乳糖、D-甘露糖和D-木糖。 D-Glc：一般不存在于糖蛋白及蛋白聚糖中，绝大多数糖脂中存在。 D-Gal：乳汁中与Glc形成乳糖、糖蛋白、糖脂、硫酸角质素类糖胺聚糖、与L-Gal以糖苷键连成琼脂糖（agrose）大分子。 D-Man：主要以甘露聚糖形式存在于植物中。 D-Xyl：蛋白多糖、糖胺聚糖、植物糖蛋白。 糖复合物中的单糖衍生物 I 甲基糖类，是6-脱氧己糖，亲脂性增强。L-fucose存在于大多糖蛋白的糖链、分子量较大的糖脂及血型抗原中，不存在于糖胺聚糖中。抗生素中也有存在。 氨基糖类 重要的是2-氨基己糖，包括: 2-氨基-2-脱氧-D-葡萄糖[D-glucosamine, GlcN] 2-N-乙酰葡萄糖胺[2-N-acetylglucosamine, GlcNAc] 2-N-乙酰半乳糖胺[2-N-acetylgalactosamine, GalNAc] 存在于几丁质、糖胺聚糖[粘多糖]中。 胞壁酸 常见单糖及其衍生物的缩写 阿比可糖 糖复合物中的单糖衍生物 II 糖醛酸类，主要四种：D-葡萄糖醛酸、D-甘露糖醛酸、D-半乳糖醛酸及L-艾杜糖醛酸[L-Iduronic acid]。 唾液酸[sialic acid]，代表一类神经氨[糖]酸[Neuraminic acid]，广泛存在于细菌和动物组织中，糖脂和糖蛋白的组成成分。 单糖的物理性质 旋光度，一切糖类都有不对称C，都具旋光性； 甜度，各种糖甜度不一，但都有甜度，程度不同； 溶解度，多羟基增加了单糖的溶解度，热水中更大，不溶于乙醚、丙酮等有机溶剂。 * 过（高）碘酸氧化分子中相邻的-OH或-C=O化合物，将相邻的C链断裂，生成断裂C的醛基或羧基化合物。 * Fehling reagent：碱性酒石酸铜试剂 * Abequose：阿比可糖，3-脱氧-D-岩藻糖。 Muramic acid：胞壁酸。 Neuraminic acid：神经氨（糖）酸，甘露糖胺丙酮酸。 葡萄糖为溴水氧化 酮糖不能被溴水氧化 葡萄糖为硝酸氧化 电解氧化（制备糖酸） 高碘酸氧化(Periodate oxidation) 糖类用高碘酸氧化时，碳链发生断裂。相邻两个碳原子都带有羟基，或一个带有羟基，另一个带有醛基，碳-碳键都发生断裂，反应常是定量的。每摩尔碳-碳键消耗1摩尔高碘酸，因此高碘酸可用于糖类结构的测定。 ?D－葡萄糖水溶液在pH＝3.7时用高碘酸氧化，生成的2－O－甲酰基甘油醛是稳定