水蛭对血瘀并脑栓塞大鼠血浆6-k-PGF1α及TXB2的影响_0.docVIP

水蛭对血瘀并脑栓塞大鼠血浆6-k-PGF1α及TXB2的影响 【关键词】 水蛭；大鼠；血瘀；脑血栓；6-k-PGF1α；TXB2 　　【摘要】 目的 观察水蛭对血瘀大鼠脑血栓后血浆中6-k-PGF1α及TXB2的 影响 。 方法 采用体内血栓形成仪，在寒凝血瘀基础上制作大鼠脑血栓模型，灌胃给予水蛭粉混悬液，通过放射免疫法测定大鼠血浆中6-k-PGF1α及TXB2的含量。结果 造模后8h、24h、48h的大鼠行为障碍评分3.3~4.4，6-k-PGF1α显著降低，TXB2明显升高；水蛭可明显逆转上述改变。结论 水蛭可明显改善血瘀血栓大鼠的行为障碍，抑制其血浆中6-k-PGF1α的减少及TXB2增加。 【关键词】 水蛭；大鼠；血瘀；脑血栓；6-k-PGF1α；TXB2 水蛭为环节动物水蛭科蚂蟥（Whitmania pigra Whitman）、水蛭（Hirude nipponica Whitman）或柳叶蚂蟥（W.acranulata Whitman）的干燥全体，具有破血、逐瘀、通经的作用。 现代 药 理学 研究 表明，水蛭含水蛭素、肝素、抗血栓素等物质，水蛭能活血祛瘀,活化纤溶系统,促进已形成血栓溶解［1］，改善脑缺氧状况,降低血液黏稠度及血脂水平,抑制体内外形成血栓［2］,故临床常与其他药配伍 治疗 脑血栓。本研究观察了水蛭对血瘀并脑血栓大鼠血浆中6-k-PGF1α及TXB2的影响，旨在为了进一步探讨水蛭的作用机理。 1 材料与方法 1.1 实验材料 1.1.1 动物 Wistar大鼠，山东大学医学院实验动物中心提供，SPF级动物［许可证号SCXK（鲁实验动物质量合格证№：0000111）。 1.1.2 药物与试剂 水蛭粉，过100目筛，呈棕黄色至棕褐色，为本院实验室自制。血浆6-k-PGF1α、TXB2放免试剂盒由北京东亚免疫技术研究所提供。 1.1.3 仪器 γ-放免计数器（西安凯普机电有限公司）；DDL-5型冷冻离心机（上海安亭 科学 仪器厂）； 电子 天平R2000D（日本产）；BT87-3型体内血栓形成仪（包头医学院心血管病研究室研制）。 1.2 方法 取12月龄大鼠，雌雄各半，体重350g左右，共40只，随机分为4组：对照组，血瘀并脑血栓模型组。水蛭高、低剂量组。水蛭高、低剂量组灌胃水蛭0.81g/kg、2.7g/kg（1ml/100g体重）；对照组和模型组灌胃等容量的生理盐水，连续9天。于第6天除对照组外，其余大鼠均先冰浴并皮下注射肾上腺素复制血瘀模型［3］，第7天10%水合氯醛0.3g/kg麻醉后，仰卧固定，颈部切开皮肤分离一侧颈总动脉、颈外动脉，利用体内血栓形成仪刺激颈总动脉，5mA，4min，待颈总动脉血栓形成，夹闭颈外动脉。轻揉颈动脉血栓，使之脱落、颈动脉再通，血栓随血流经颈内动脉到达大脑中动脉，形成以大脑中动脉阻断为主的局灶性脑栓塞。观察动物行为障碍的程度判定栓塞模型成功，评分标准 参考 Bederson等［4］的方法，分数越高，动物的行为障碍越严重。观察测定脑栓塞后8h、24h、48h时的行为学指标，并在每个时间点颈静脉取血EDTA-消炎痛抗凝，4 3500rpm离心15min，分离血浆，按说明书测定6-k-PGF1α及TXB2。 2 结果 见表1~3。血瘀大鼠脑栓塞后8h、24h、48h的行为学指标评分3.3~4.4分，6-k-PGF1α显著降低，TXB2明显升高；与血瘀+脑栓塞组比较，0.81g/kg剂量水蛭使大鼠脑血栓后行为评分减少，6-k-PGF1α显著增高，TXB2明显降低；0.27g/kg水蛭在48h行为评分显著减少，脑血栓24h、48h后6-k-PGF1α显著增高，TXB2明显降低。 2.1 水蛭对血瘀大鼠脑血栓后不同时间的行为指标评分的 影响 见表1。表1 各组血瘀大鼠脑血栓后不同时间的行为指标评分注：与血瘀+脑栓塞组比较，*P0.05；**P0.01 2.2 水蛭对血瘀大鼠脑血栓后不同时间血浆6-k-PGF1α的影响 见表2。表2 各组血瘀大鼠脑血栓后不同时间血浆6-k-PGF1α水平注：与血瘀+脑栓塞组比较，*P0.05；**P0.01 2.3 水蛭对血瘀大鼠脑血栓后不同时间的血浆TXB2的影响 见表3。 表3 各组血瘀大鼠脑血栓后不同时间的血浆TXB2影响 注：与血瘀+脑栓塞组比较，*P0.05，**P0.01 3 讨论 祖国医学认为中风的基本病机为血瘀，临床上脑栓塞多发生在血瘀基础上。本实验在血瘀证大鼠的基础上，先刺激形成体内颈动脉血栓，再使血栓脱落形成以大脑中动脉栓塞为主的局灶性脑缺血，并以行为障碍评分为指标，判定形成以大脑中动脉栓塞为主的局灶性脑缺血动物模型。既易于操作，又符合脑栓塞的发病机制。 血栓烷A2（thro