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2.1实验二、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 谢俊平 2016.10.16 一、学习目标 1.学会使用试剂检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的方法。 2.掌握根据实验的需要正确选择实验材料的能力。 3.尝试使用斐林试剂、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂、碘液检测食物中的糖类、脂肪和蛋白质。 4.提高实验及动手操作能力，体会实验设计的基本思想。 二、观察与思考 （一）提出问题 豆浆中有蛋白质吗？苹果中有葡萄糖吗？花生中有脂肪吗？我们怎么知道燕麦中含有淀粉呢？ （二）猜想与假设 提示：不同的化合物可以用不同的试剂来检测。 （三）交流讨论 三、实验解析 （一）实验原理 生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生特定的颜色反应。还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化，Cu(OH)2被还原为Cu2O（砖红色）；具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成络合物（紫色）。 2.脂肪+苏丹Ⅲ染液→橘黄色 脂肪+苏丹Ⅳ染液→红色 3.蛋白质+双缩脲试剂→紫色 （二）主要实验材料： 1.苹果或梨匀浆，马铃薯匀浆，花生种子、花生种子匀浆，豆浆，鲜肝提取液 2. 斐林试剂（甲液：质量浓度为0.1g/ml的NAOH溶液，乙液：0.05g/ml的CuSO4溶液），苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，双缩脲试剂（A液：质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液，B液：0.01g/ml的CuSO4溶液），体积分数为50%的酒精溶液，碘液，蒸馏水。 （三）方法与步骤： 1.还原糖的检测和观察 注：溶液颜色的变化过程为浅蓝色→棕色→砖红色 2.脂肪的检测和观察 3.蛋白质的检测和观察 （四）注意事项 1.使用斐林试剂时要现用现配，以免放置过久产生Cu(OH)2沉淀影响实验效果；试管要用水浴加热，不能直接接触酒精灯。 2.使用双缩脲试剂时要先加入NaOH创设碱性环境，然后再加入CuSO4。 3.实验不宜选择有颜色的材料，否则会干扰实验结果的颜色变化。 （五）实验变量分析 在本实验中，组织样液的新鲜程度和初始颜色、试剂的纯度和配制的时间为无关变量，都会影响颜色的变化，从而影响对实验结果的分析判断。 四、实验结论与分析 （一）实验结果与预测结果的比较 需鉴定的有机物 用于鉴定的试剂 预期实验现象 实际观察到的现象 误差分析 还原糖 蛋白质 淀 粉 脂 肪 （二）在本次实验中你遇到了那些问题？你是怎样解决的？ 五、例题分析： 香蕉果实成熟过程中，果实中的贮藏物代谢转化，香蕉逐渐变甜。图A中ⅠⅡ两条曲线分别表示香蕉果取成熟第X天和第Y天的等量香蕉果肉，分别加等量的蒸馏水制成提取液。然后在a、b试管中各加5ml第X天的提取液，在c、d试管中各加5ml第Y天的提取液，如图B。 （1）在a、c试管中各加入等量碘液后，a试管呈蓝色，与a管相比c管的颜色更 ，两管中被检测的物质是 ，图A中表示这种物质含量变化趋势的曲线是 。 （2）在b、d试管中各加入等量斐林试剂，b试管呈砖红色，与b管相比d管的颜色更 ，两管中被检测的物质是 ，图A中表示这种物质含量变化趋势的曲线是 。 （3）已知乙烯利能增加细胞内乙烯的含量。如果在第X天喷施乙烯利，从第X天开始曲线Ⅰ将呈现出 (加快、减慢)下降的趋势，曲线Ⅱ将呈现出 （加快、减慢）上升趋势。ml 0.1g/ml的NaOH溶液 ③加入0.01g/ml CuSO4溶液④加入0.05g/ml CuSO4 溶液 ⑤水浴2 分钟 ⑥出现砖红色沉淀 A.①→②→③→⑤→⑥ B.①→（②+③）→⑤→⑥ C.①→②→④→⑤→⑥ D.①→（②+④）→⑤→⑥ ２.用斐林试剂鉴定可溶性还原性糖时，溶液的颜色变化过程为　　　　　　　　　（　　） A.浅蓝色→棕色→砖红色 B.无色→浅蓝色→棕色 C.砖红色→浅蓝色→棕色 D.棕色→绿色→无色 ３.有关斐林试剂和双缩脲试剂的说法正确的是　　　　　　　　　　　　　　　（　　） A.两者的NaOH浓度相同 B.两者的CuSO4浓度相同 C.实验时只能采用课本中给定的浓度 D.用两者鉴定物质时都不需要加热 ４.在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，下列有关实验操作步骤的叙述中，正确的是（ ）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 A.用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定 B.脂肪的鉴定实验中需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴 C.鉴定