第03章 高效液相色谱法课件.pptVIP

* 第三章 高效液相色谱法 第一节 高效液相色谱法 第二节 主要分离类型与原理 第三节 液相色谱的固定相与流动相 第四节 影响分离的因素与操作条件的选择 第五节 制备型液相色谱 第六节 高效毛细管电泳 第六节 高效毛细管电泳一、高效毛细管电泳仪器 二、高效毛细管电泳基本原理 在电解质溶液中，位于电场中的带电离子在电场力的作用下，以不同的速度向其所带电荷相反的电极方向迁移的现象，称之为电泳。由于不同离子所带电荷及性质的不同，迁移速率不同可实现分离。 经典电泳分离法的不足：所用 分离柱的柱径大，柱较短，分 离效率不高（远低于HPLC）， 温度影响大。 高效毛细管电泳在技术上采取 了两项重要改进。 高效毛细管电泳在技术上采取了两项重要改进： 一是采用了0.05mm内径的毛细管； 二是采用了高达数千伏的电压。 ★ 毛细管的采用使产生的热量能够较快散发，大大减小了温度效应，使电场电压可以很高。 ★ 电压升高，电场推动力大，又可进一步使柱径变小，柱长增加， ★ 高效毛细管电泳的柱效远高于高效液相色谱，理论塔板数高达几十万块/米，特殊柱子可以达到数百万。 电泳现象与电渗流现象 电泳现象：带电离子在电场作用下的迁移，速度v电泳 电渗流现象： 玻璃表面存在硅羟基, pH3时, 形成双电层，在高电场的作用下引起柱中的溶液整体向负极移动，速度v电渗流 分离过程：