土壤微生物综合实验报告.docVIP

广州大学 综合设计性实验报告 课程：微生物实验 实验课题：土壤中产淀粉酶芽孢杆菌的筛选及淀粉酶 活力的测定 学院：生命科学学院 姓名：徐嘉宽 学号：1414300030 班级：生技142 小组成员： 实验摘要 本次实验通过采用5点采样方法在校园中采取2处土壤样品，运用梯度稀释的方法分离培养出不同生长形态的细菌，镜检后挑选几个菌落进行纯培养，用淀粉培养基鉴定其是否产淀粉酶，通过单染色、芽孢染色、革兰氏染色确定菌株的形态及革兰氏阴阳性，再通过各种生化试验鉴定菌株的特性，确定了我们所分离的2株菌株其中一株为蜡状芽孢杆菌。 实验目的 掌握土壤复杂的微生物环境分离技术 的方法培养方法 常用的微生物鉴定方法、生理生化鉴定方法 微生物方法、鉴定方法 掌握菌种保藏技术 统计、分析能力 精神，增强沟通合作能力 小组交流合作、数据共享，深入的探讨 查找、收集整理资料 原理 土壤中蕴含着丰富的微生物资源,芽孢杆菌是其中具有重要应用价值的微生物类群。有些菌种可以分泌多种酶,可应用于工业生产;有些菌种能产生对昆虫毒性较强的蛋白,可生产微生物农药;有些菌种可作为多种分泌蛋白基因表达受体,在基因工程领域中有较高的应用价值。?土壤具有微生物进行生长繁殖和生命活动中所需的各种条件，是微生物生活最适宜的环境。其中的微生物的数量因土壤类型、季节、土层深度与层次等不同而异。一般地说，在土壤表面，由于日光照射及干燥等因素的影响，微生物不易生存，离地表10?cm～30?cm的土层中菌数最多，随土层加深，菌的数量减少。 广州大学城四面环，定区域淀粉酶的 实验材料 配方 ： 工具:取样：铁锹、、等 针）、培养皿、试管、、、塞子、、打火机、、报纸、无菌棉签、 其他工具操作台、恒温培养箱 牛肉膏蛋白胨培养基：蒸馏水mL、pH7.2-7.4。 营养肉汤:牛肉膏0.3%、蛋白胨1.0%、NaCl 0.5%、蒸馏水100ml、pH（5.7、7.2→对照）。 半固体培养基(运动性试验）: 琼脂0.5%、牛肉膏0.3%、蛋白胨1.0%、NaCl 0.5%、蒸馏水100ml、pH7.2-7.4。 酪素水解培养基（酪素水解试验):取5g脱脂奶粉与一号三角瓶中，加入50ml蒸馏水，110℃灭菌。另称1.5g琼脂置于含50mL蒸馏水的二号三角瓶中,120℃灭菌,待冷至45-50°C时,将两液混匀倒成平板,即为牛奶平板。将平板倒置过夜,使表面水分干燥。 淀粉水解培养基:营养琼脂3.3%、可溶性淀粉2%、蒸馏水100ml、PH7.2-7.4 卵黄反应培养基： 无菌条件下去卵黄加等量的生理盐水，摇匀后，取5ml加入到融化的约 50-55℃的100ml的营养琼脂中（内含1g葡萄糖)，混匀后倒入培养皿内。制成的卵黄平板过夜后即可使用。 硝酸盐还原实验培养基:胰蛋白胨1.0%,酵母浸粉0.5%,NaCl 1.0%, KN03 0.1%,蒸馏水 1OOmL,调节pH7.0。 发酵培养基: 玉米粉2%、黄豆饼粉1.5%、CaCl2 0.02%、MgSO4 0.02%、NaCl 0.25%、K2HPO4 0.2%、柠檬酸钠0.2%、硫酸氨0.075%(溶解后加)、Na2HPO4 0.2%,pH值7.0。 明胶培养基： NaCl 0.5%、蛋白胨1.0%、牛肉膏0.3%、明胶12%、蒸馏100mL，调pH 7.2-7.4。 西蒙斯氏柠檬酸钠盐培养液： 柠檬酸钠0.2%、NaCl 0.5%、MgSO40.02%、磷酸二氢钾0.1%、磷酸氢氨0.1%、 溴麝香草酚蓝水溶液1ml、琼脂2%、蒸馏水100ml、PH7.2-7.4。 耐盐试验培养基（2%、5%、7%、10%）： 营养琼脂3.3%、NaCl（0.2%、0.5%、0.7%、1.0%）、蒸馏水100ml、PH7.2-7.4。 糖发酵培养基（110℃灭菌） 12-1葡萄糖发酵培养基： 葡萄糖1.0%、蛋白胨0.2%、NaCl 0.5%、磷酸氢二钾0.02%、溴钾分子0.2%（最后加入）、PH7.2-7.4。 12-2乳糖发酵培养基： 乳糖1.5%、蛋白胨0.2%、NaCl 0.5%、磷酸氢二钾0.02%、溴钾分子0.2%（最后加入）、PH7.2-7.4。 12-3木糖发酵培养基： 木糖1.0%、蛋白胨0.2%、NaCl 0.5%、磷酸氢二钾0.02%、溴钾分子0.2%（最后加入）、PH7.2-7.4。 12-4阿拉伯糖培养基： 阿拉伯糖1.0%、蛋白胨0.2%、NaCl 0.5%、磷酸氢二钾0.02%、溴钾分子0.2%（最后加入）、PH7.2-7.4。 12-5甘露醇发酵培养基： 甘露醇1.0%、蛋白胨0.2%、NaCl 0.5%、磷酸氢二钾0.02%、溴钾分子0.2%（最后加入）、PH7.2-7.4。 葡萄糖蛋白胨培养基(VP、MR试验）（