网站大量收购独家精品文档,联系QQ:2885784924

0细胞生物学研究方法.pptx

  1. 1、本文档共124页,可阅读全部内容。
  2. 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
  3. 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  4. 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
0细胞生物学研究方法课件

第二章 细胞生物学研究方法 ;光学显微镜(light microscope ) 电子显微镜(electron microscope);Figure 3-1. Resolving power. Sizes of cells and their components drawn on a logarithmic scale, indicating the range of objects that can be readily resolved by the naked eye and in the light and electron microscopes. ;尼康E-600显微镜 ;Light Pathway of Microscope;普通显微镜最大放大倍数1000-1500倍 因为它的分辨率有限,再放大也是空放大; ;;普通光学显微镜;组织切片的制备;1.胞核染色剂:苏木素,胭脂红,甲苯胺蓝,美蓝,孔雀绿等。 2.胞浆染色剂:伊红,淡绿,橘黄G,酸性品红,苦味酸等。 3.脂质染色剂:苏丹Ⅲ,苏丹Ⅳ,苏丹黑,硫酸尼罗蓝及油红等。;有丝分裂中期固定的洋葱根尖细胞中,福尔根染色的结果, 特异显示DNA;1.胞核染色剂:苏木素,胭脂红,甲苯胺蓝,美蓝,孔雀绿等。 2.胞浆染色剂:伊红,淡绿,橘黄G,酸性品红,苦味酸等。 3.脂质染色剂:苏丹Ⅲ,苏丹Ⅳ,苏丹黑,硫酸尼罗蓝及油红等。;(二)紫外线显微镜(ultraviolet microscope) 根据光学原理,光源光波越短,显微镜的分辨本领越大。紫外线显微镜以紫外线为光源,分辨率可提高一倍。 可看到在普通光学显微镜下看不到的胶体颗粒。 可用来测定细胞中的核酸含量。 透镜:石英、萤石(CaF2)、碳酸锂等制作。 价格昂贵,使用受限。;(三)荧光显微镜(fluorescent microscope) 20世纪40年代在紫外线显微镜基础上发明。 原理:细胞中有些物质,如叶绿素等,受激发光照射后可发荧光;另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经过照射也可发荧光。荧光显微镜对这类物质进行定性或定量研究。;结构:在普通光学显微镜上添加一些附件: A.光源:通常采用超高压汞灯或氙灯,由它发出各种波长的光。 B.滤片:根据性能分为两组。 一是激发滤片,作用是仅使一定波长的激发光透过照射到标本上,而将其它光都吸收掉。 二是阻断滤片,安装在物镜后,作用是吸收和阻挡激发光进入目镜,以免干扰荧光和刺伤眼睛;选择并让特异的荧光透过,表现出专一的荧光色彩。 敏感性高,主要用于细胞结构和化学成分等的研究。;荧光显微镜;(四)暗视野显微镜(dark field microscope) 原理:显微镜加装挡光片,使直射光不能进入物镜,只允许被标本反射、衍射的光线进入物镜 特点:视野的背景是暗的,样品的边缘是亮的。 特殊装置:在聚光器中加装中央遮光板或者使用暗视野光阑;(五)相差显微镜(phase contrast microscope) 相差显微镜由P.Zernike于1932年发明,并因此获1953年诺贝尔物理奖。这种显微镜最大的特点是可以观察未经染色的标本和活细胞。 原理:将透过标本的可见光的光程差(也就是相位差)变成明暗差(即振幅差),从而提高了各种结构间的对比度,使各种结构变得清晰可见。 ;构造: 聚光器或光源上安装环状光阑(annular diaphragm); 在物镜中加了环形相板(annular phase plate)。 主要用于观察活细胞或活组织,是体外细胞和组织培养工作的重要工具。;相差显微镜;(六)微分干涉相差显微镜(differential interference contrast (DIC) microscope ) 1952年,Normaski在相差显微镜原理的基础上发明。 能显示结构的三维立体投影影像。; 分离的有丝分裂纺锤体 左、微分干涉显微镜;右、相差显微镜; ;(七)激光共聚焦扫描显微镜(laser confocal scanning microscope) 用激光作扫描光源,逐点、逐行、逐面快速扫描成像,图像以电信号形式记录。 由于激光束的波长较短,光束很细,有效排除焦点以外的光信号干扰,所以共焦激光扫描显微镜有较高的分辨力,大约是普通光学显微镜的3倍。 激光共聚焦扫描显微镜随时采集记录信号,既可以用于观察细胞形态,也可以用于细胞内生化成分的定量分析、光密度统计以及细胞形态的定量。 ;laser confocal scanning microscope

文档评论(0)

jiayou10 + 关注
实名认证
内容提供者

该用户很懒,什么也没介绍

版权声明书
用户编号:8133070117000003

1亿VIP精品文档

相关文档