NJUST 分子生物学课件 05DNA复制.pptVIP

真核生物DNA的复制特点 有多处复制起始点； 在全部完成复制之前，各个起始点上DNA的复制不能再开始； DNA复制只在S期进行。 复制子相对较小，为40-100千碱基对。 真核生物DNA的复制子被称为ARS (autonomously replicating sequences)，长约150bp左右，包括数个复制起始必需的保守区。 真核生物DNA复制的起始需要起始点识别复合物（origin recognition complex，ORC）参与，ORC结合于ARS，它是由6种蛋白质组成的启动复合物。 真核生物DNA复制叉的移动速度大约只有50bp/秒。 因此，人类DNA中每隔30,000-300,000bp就有一个复制起始位点。 已发现的真核生物DNA聚合酶有15种以上。 在哺乳动物细胞中主要有5种DNA聚合酶，分别称为DNA聚合酶α、β、γ、δ和ε 。 真核生物DNA聚合酶的特性比较 性质 DNA 聚合酶α DNA 聚合酶β DNA 聚合酶 γ DNA 聚合酶δ DNA 聚合酶ε 亚基数 4 1 2 2-3 ≥1 在细胞内分布 核内 核内 线粒体 核内 核内(?) 功能 DNA 引物合成 损伤修复 线粒体DNA 复制 主要DNA复制酶 DNA复制(?) 3→5外切 无 无 有 有 有 5→3外切 无 无 无 无 无 ? DNA聚合酶α主要参与引物合成。 DNA聚合酶β活性水平稳定，主要在DNA损伤的修复中起作用。 DNA聚合酶δ主要负责DNA的复制。 DNA聚合酶ε与后随链合成有关，在DNA合成过程中核苷切除以及碱基的切除修复中起着重要的作用。 DNA聚合酶?在线粒体DNA的复制中发挥作用。 真核生物中还存在?、?、?和?等几种DNA聚合酶，它们承担着修复损伤的功能，但这些修复酶的忠实性都很低。 5.8 DNA修复(DNA Repair) Mutation Replication Fidelity (复制的精确性) Mutagens Mutagenesis (诱变) （突变） (诱变剂) Mutation Mutation: Permanent, heritable alterations in the base sequence of DNA. Deletion or Insertion（缺失或插入） The elimination or addition of one or more nucleotides in a DNA region.? It may cause frameshift(移码突变) producing a non-functional protein. 由于染色体DNA在生命过程中占有至高无上的地位，DNA复制的准确性以及DNA日常保养中的损伤修复就有着特别重要的意义。 DNA的修复(DNA Repair) 本章结束， 谢谢！ * * DNA polymerase I catalyzes the incorporation of dNTPs at a maximal rate of 20 nt/sec (approximately) At this rate it would take approximately 460,000 seconds (= 5.3 days) to copy the E. coli chromosome This is much to slow for an organism which can divide every 20 minutes * * 第一批复制子的激活标志着S期的开始。在之后的几个小时里，其余的复制子相继启动。 * 酿酒酵母的复制起始位点已经被鉴定出来，后来在其它的真核生物中也发现类似于酵母ARS元件的顺序。不同ARS序列的共同特征是具有一个被称为A区的11个A-T碱基对的保守序列。 真核生物DNA复制的起始需要起始点识别复合物（origin recognition complex，ORC）参与，人们首先在酿酒酵母中发现了ORC，之后在裂殖酵母、果蝇和爪蟾中鉴定出相似的复合物，ORC结合于ARS，它是由6种蛋白质组成的启动复合物。 * * * * * DNA复制的转录激活 (transcriptional activation） RNA polymerase [ Rif S ] 10 Nt RNA primer for leading Strand origin dnaG primase [ Rif R ] for lagging Strand primosome