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克隆: (1)概念:从一个共同的祖先,通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或者个体。 (2)三个层次 ①分子水平:如PCR技术扩增DNA ②细胞水平:如动物细胞培养 ③个体水平:如多利羊的诞生 * 温故知新: 1、植物组织培养过程?原理? 2、植物组织培养成功的关键? 3、哪个过程需要避光进行?原因?哪个过程需要光照? 原因? 4、植物体细胞杂交包括哪些过程?原理? 5、如何去除细胞壁?促进原生质体融合的方法? 6、植物细胞融合成功的标志?植物体细胞杂交技术完成的标志? 7、植物体细胞杂交技术属于哪种生殖方式?变异类型是? 8、植物体细胞杂交技术的意义? 9、培育脱毒苗时取材部位是? 10、人工种子的结构组成? 学习目标: 1.简述动物的细胞培养的过程、条件及应用。 2.简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 【重点】 1.动物细胞培养的过程及条件; 2.用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 【难点】 用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 2.2 动物细胞工程 生产单克隆抗体等 动物细胞工程常用的技术 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 是其他动物细胞工程技术的基础。 1.动物细胞培养 如何进行细胞培养? 2.2.1动物细胞培养和核移植技术 从动物机体中取出相关组织,将它们______________,然后___________________,让这些细胞____________。 1.1 概念 分散成单个细胞 放在适宜的培养基中 生长和增殖 原理:细胞增殖 1.2 动物细胞培养过程 胚胎或幼龄动物的组织或器官 细胞悬液 10代细胞 50代细胞 剪碎 胰蛋白酶 原代培养 用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4,此环境下胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 胚胎或幼龄动物组织或器官的细胞分化程度低,增殖能力很强,更易于培养。 动物细胞培养不能最终培养成生物体 细胞增殖缓慢,核型可能变化 细胞贴壁 接触抑制 10代以内,保持正常二倍体核型 传代培养 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 细胞株 细胞系 原代培养和传代培养、细胞株和细胞系 多数组织细胞固定在表面生长和分裂 随细胞增多,细胞就会停止分裂增殖 细胞遗传物质 没有改变 部分细胞遗传物质发生改变 原代 培养 传代培养 原代培养和传代培养、细胞株和细胞系 细胞株:细胞遗传物质没有改变 细胞系:细胞遗传物质发生改变 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的内环境的知识,思考以下问题: 1.体外培养细胞时需要提供什么物质? 2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件? 讨 论 充足的营养、适宜的温度、适宜的pH和气体环境 无菌无毒的环境 1.3 动物细胞培养的条件 (无菌处理和添加抗生素、更换培养液) 与体内基本相同。合成培养基:糖、氨基酸、促生长因子(血清、血浆)、无机盐、微量元素等 (36—37℃、pH 7.2—7.4) (O2-细胞代谢所需、CO2-维持培养液PH) (95%空气 + 5% CO2 ) (1)无菌、无毒的环境 (2)营养 (3)温度和pH (4)气体环境 植物组织培养和动物细胞培养的比较 培养目的 培养结果 培养基特有成分 培养基性质 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 细胞的全能性 细胞增殖 固体培养基 液体培养基 蔗糖 植物激素 葡萄糖 动物血清 获得植株或细胞产物 获得细胞或细胞产物 植物体 细胞株、细胞系 1.4 动物细胞培养技术的应用 1.生产生物制品:如病毒疫苗、干扰素、单克隆 抗体等。 2.应用于基因工程:动物细胞是基因工程中常用的受体细胞,离不开动物细胞培养。 3.检测有毒物质,判断某种物质的毒性。 4.用于生理、病理、药理等方面的研究,如筛选抗癌药物等。 1.动物细胞工程技术的基础是 ( ) A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养 A D 2.在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 ( ) A.细胞系 B.细胞株 C.原代细胞 D.传代细胞 习题巩固: 3. (2010·高考浙江卷)下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是( ) A.培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞 B.克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变 C.二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的 D.恶性细胞系的细
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