实验五培养细胞的形态观察和计数.pptVIP

实验五培养细胞的形态观察和计数 实验目的 了解培养中的动物细胞的一般形态和生长状态；掌握细胞计数的基本方法。 实验用品 一、材料和标本 培养中的几种细胞。 二、器材和仪器 倒置显微镜、细胞计数板、普通光学显微镜、乳头吸管。 三、试 剂 0.3% 台盼兰染液等 实验内容 一、培养细胞的形态观察 (一)原理 体外培养的细胞主要有两种状态。一种是能贴附在培养支持物上的细胞 , 如内皮细胞,叫贴壁型细胞。体外培养的细胞绝大多数都属于这种细胞。另一种细胞-并不贴附在容器的壁上，而是悬浮在培养液中生长，如 HL-60, 叫做悬浮型细胞,这类细胞主要是血液原性或癌原性的细胞。 (二) 操作 1.从培养箱中取出细胞培养瓶,注意观察细胞培养液的颜色和清澈度。然后,将细胞培养瓶平稳地放在倒置显微镜载物台上。 2.打开倒置镜光源, 通过双筒目镜将视野调到合适的亮度。 3.调节载物台的高度进行对焦, 在看到细胞层之后, 再用细调节器将物像调清楚, 注意观察细胞的轮廓、形状和内部结构。在观察时，最经常使用的是10×物镜。 （三）结果 贴壁细胞一般有两种形状,即上皮细胞形和成纤维细胞形细胞。上皮细胞形细胞呈扁平的不规则多角形,圆形核位于中央,生长时常彼此紧密连接成单层细胞片, 如HeLa 细胞。成纤维细胞形细胞形态与体内成纤维细胞形态相似,胞体呈梭形或不规则三角形,中央