维生素 D说明书.pdf

25-羟基维生素 D 检测试剂盒 (酶联免疫法) 一. 预期用途: 用于体外定量测定人血清中的25-羟基维生素D (D2 和 D3 )的浓度。 二. 综合信息: A. 产品名称：25-羟基维生素 D 检测试剂盒(酶联免疫法) B. 产品货号: KAP1971 96 人份 三. 临床背景: 维生素D是指维生素D2(或麦角骨化醇)和维生素D (或胆骨化醇)的通称。皮肤暴露在日光紫外线下时, 3 人体可自然产生维生素D3。维生素D3和维生素D2也可通过食物膳食补充摄入。 维生素D3主要在肝脏中代谢为25-羟基维生素D3 （25OH D3）,是维生素D在体内循环的主要形式。25- 羟基维生素D3是其他维生素D代谢物的前体，具有一定的生物活性。而主要的活性物是1,25-二羟基维生素 D3，在肾脏（或胎盘）内，由25-羟基维生素D3羟基化生成。25-羟基维生素D有促进肠道钙、磷的吸收以 及骨吸收和矿化作用。并在其他组织器官 （胎盘，肾脏，乳腺等）和内分泌腺（甲状旁腺，β 细胞等）中 负责钙转运。 维生素D2的代谢过程与D3相似,共同维持个体的维生素D状态。在诊断维生素D缺乏、不足或中毒时， 测量这两种25-羟基维生素D形式是非常重要的。维生素D缺乏可能导致佝偻病，骨软化症,老年性骨质疏松 症，癌症及妊娠反应。检测25-羟基维生素D的两种形式，可以确认血钙浓度是否异常。维生素D中毒可引 起肾脏和组织损伤。 四．方法学原理: 该试剂是一个在微孔板上进行的酶联免疫试验。第一阶段，室温孵育2小时，校准品，质控品和样品 中的25-羟基维生素D(D2和 D3 ) 脱离结合的血清蛋白,并与特异性的单克隆抗体结合。洗板后加入辣根过 氧化物酶（HRP），室温下孵育30分钟。孵育过程中生物素标记的25-羟基维生素D与未标记的25-羟基维生 素D2和D3竞争单克隆抗体上的结合位点。洗板后，加入显色溶液（TMB）孵育15分钟。最后加入终止液停 止反应并在适当的波长下读取吸光度。底物的量是通过测量吸光度来决定的，吸光度值与25-羟基维生素D （D2和D3）的浓度成反比。 绘制校准曲线，样品中25-羟基维生素D （D2和D3）的浓度由校准曲线插入值决定。 五．试剂组成: 试剂组分 数量 颜色代码 使用方法 96孔 蓝色 备用 96孔板，包被了抗25-羟基维生素D2和D3的单克 隆抗体 1瓶; 冻干品 黄色 加入2ml蒸馏水 校准品0：含庆大霉素与proclin的生物基质 5瓶; 冻干品 黄色 加入1ml蒸馏水 校准品1-5 （见瓶签）：马血清与庆大霉素与 proclin的混合物 2瓶; 冻干品 银色 加入1ml蒸馏水 质控品 N=2, 含有proclin的人血清 1瓶; 20ml 绿色 备用 孵育缓冲液：含有干酪素和proclin 1瓶;0.4ml 蓝色 用结合物缓冲液稀释100倍 25-羟基维生素D的浓缩结合物 1瓶;30ml 红色 备用 含有干酪素和proclin的结合物缓冲液 1瓶;0.2ml 黄色 用结合物缓冲液稀释200倍 浓缩辣根过氧化物酶溶液 1瓶;10ml 棕色 用蒸馏水液稀释200倍(磁力 洗液 (TRIS-HCL) 搅拌器搅拌)