第三章 胞浆信号转导.ppt

§3.1 蛋白质可逆磷酸化 蛋白质活性主要由变构效应和共价修饰方式来调节, 可逆磷酸化是一种最普遍的可逆共价修饰调节蛋白质活性的方式（糖基化，硝基化，甲基化） 蛋白质的磷酸化是指由蛋白激酶催化ATP或者GTP的γ-磷酸基转移到底物蛋白的特定氨基酸残基上的过程. 50 年代，Krebs 和Fischer 发现第一个蛋白激酶即磷酸化酶b 激酶；60 年代，Krebs 又发现了cAMP 依赖的蛋白激酶A，并证明蛋白激酶A 是细胞内最重要的丝/苏氨酸蛋白激酶之一； 1970 年Greegard 发现了cGMP 依赖的蛋白激酶G， 1977 年日本的西冢泰美发现了Ca2+ 和磷脂依赖的蛋白激酶C； 1980 年，Hunter在动物中首次发现酪氨酸蛋白激酶， 已知基因组中大约有1—2%的基因编码蛋白激酶。迄今已发现的蛋白激酶有400 种左右，预计可超过1000 种，可以说是真核细胞中最大的蛋白超家族。 蛋白磷酸酶达100 多种。催化活性相同的蛋白激酶或蛋白磷酸酶组成一个个酶家族。 （一）可逆磷酸化在细胞信号转导中的作用 1. 参与跨膜信号转导的启动 受体型蛋白激酶、非受体型蛋白激酶 2. 参与细胞内的信号转导 多种蛋白激酶作为第二信使的信号接受器 通过酶促级联反应导致信号的转导 磷酸化产生的位点为下游信号蛋白提供识别和结合部位 蛋白质可逆磷酸化是细胞信号转导的重要机制之一，而细胞信号转导系统又控制着细胞的各种功能。 受可逆磷酸化调节的蛋白质包括酶、离子通道、离子泵、骨架蛋白、收缩蛋白、受体、信号转导蛋白、转录因子等。 蛋白质可逆磷酸化是细胞代谢、物质转运、细胞粘附及细胞生长、发育和凋亡等的调控中心，在几乎所有的生命活动中如肌肉收缩、免疫细胞的激活，包括学习记忆在内的神经活动、细胞应激反应等过程中发挥重要作用，并与肿瘤等疾病的发生密切相关。 （三）可逆磷酸化在基因转录调控中的作用 基因转录是由基因转录起始位点5ˊ侧上游的顺式作用元件与调控基因表达的各种反式作用因子，主要是转录因子之间的相互作用引发的。 这一过程中最关键的步骤是激活转录因子，而磷酸化与去磷酸化是调节转录因子活性的重要方式，许多细胞外信号就是通过各种信号转导通路使转录因子磷酸化而调节基因表达的 1. 磷酸化对转录因子核转位的调节 NF-κB的核转位调节 STATs的核转位调节 2. 磷酸化对转录因子DNA结合活性的调节 Myb (-) 磷酸化抑制其DNA结合活性 AP-1 (-) c-Jun + c-Fos, 静息状态下c-Jun DNA结合区N-端高度磷酸化，阻止其结合DNA， P53 (+) CKⅡ磷酸化Ser392 Myc (+) N 端Ser 62 磷酸化，与Max结合成二聚体，结合DNA 3. 磷酸化对转录因子转录激活功能的调节 Jun: 转录激活区N端（人Ser 63,73) ，激活 Fos: 近C端Thr232，抑制 CREB：Ser133，二聚化激活 (四)蛋白激酶 (kinase) 1. 结构：保守的激酶区 该区由250—300 个氨基酸残基 构成，构成酶的催化核心结构域， 其分子量约为30kD。 催化核心由一些保守程度不同的区域组成，其中含有12 个（I—XII）高度保守的亚区，它们被一些保守程度较低的区域分开。 激酶区的作用有： （1）与蛋白质或多肽底物结合； （2）与磷酸基的供体ATP（或GTP）结合，后者被利用前先要与二价阳离子（Mg2+或Mn2+）形成复合物； （3）将ATP 或GTP 的γ-磷酸基团转移到底物的丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基上。 不同的蛋白激酶的催化核心在酶分子中的定位并不确定，多数单亚基的蛋白激酶的催化核心位于分子的C 端，而N 端大都起调节作用。 多亚基的蛋白激酶的催化区构成一个单独的亚基；具有调节亚基或靶向亚基。 Receptor protein kinases are found in the plasma membrane. They have a domain on the exterior of the cell that binds a ligand, and a catalytic domain within the cell that can act on a target protein 蛋白激酶的分类: Ser/Thr蛋白激酶: CaMK, PKA, PKC Tyr蛋白激酶: Src, FAK, Csk, JAK 双专一蛋白激酶（DSTK): MEK 其他：DNA-PK，作用位点附近需要Gln 1. Ser/Thr蛋白激酶 （1）AGC 组：AGC 系指三个主要激酶家族，即cAMP 依赖的蛋白激酶A（PK